Euro-asian council for standardization, metrology and certification
|
Скачать 292.54 Kb.
|
|
6 Отбор и подготовка проб для испытания 6.1 Для испытания отбирают пробы лекарственного средства в количестве, указанном в таблице 1, если нет других указаний в нормативном документе на конкретное лекарственное средство. Таблица 1 – Количество образцов (ампул, флаконов) для проведения анализа от серии исследуемого лекарственного средства
При вскрытии пробы не допускают его контаминацию микроорганизмами, которые могут находиться на его внешней поверхности. Ампулы и пробки флаконов протирают 70 %-ным ректификованным этиловым спиртом и фламбируют. 6.2 Пробы сухих лекарственных средств предварительно разводят стерильным растворителем (0,9 %-ным изотоническим раствором хлорида натрия или дистиллированной водой, если не указано другого в нормативном документе на конкретное лекарственное средство) до первоначального объема, указанного на этикетке. 6.3 Высев жидких лекарственных средств проводят непосредственно из каждого флакона или ампулы. 6.4 Для посева на каждую питательную среду используют количество исследуемой пробы, приведенное в таблице 2, если нет других указаний в нормативном документе на конкретное лекарственное средство. Таблица 2 – Минимальное количество пробы для посева на питательные среды
Примечание – Объем питательной среды для посева должен в 10 раз превышать объем пробы. 7 Подготовка к испытанию 7.1 Подготовка лабораторной посуды 7.1.1 Новую стеклянную лабораторную посуду кипятят в течение 15 мин в дистиллированной воде, подкисленной раствором соляной кислоты, затем промывают водопроводной водой и моют ершом в мыльно-содовом растворе по 7.3.2. После этого посуду тщательно промывают сначала водопроводной водой, а затем три раза дистиллированной водой, высушивают и стерилизуют. 7.1.2 Стерилизуют посуду в автоклаве при 0,15 МПа в течение 60 мин или сушильном шкафу при температуре (170 ± 5) оС в течение 120 мин. 7.2 Подготовка бокса 7.2.1 Ежедневно бокс и предбоксник подвергают тщательной уборке и дезинфекции 3 %-ным раствором перекиси водорода или другими средствами аналогичного действия с соблюдением требований техники безопасности. Норма расхода дезинфицирующего раствора 7 – 100 см3/м2 при влажной уборке. Раствор готовят непосредственно перед применением. 7.2.2 Допускается дезинфицировать бокс горячим мыльно-содовым раствором температурой 50 оС — 60 оС по 7.6.2 или антисептолом по 7.3.1. В каждом боксе должны быть установлены бактерицидные лампы из расчета 2,0 – 2,5 В на 1 м3. Лампы размещают на потолке и на стенах. Бокс облучают до начала проведения испытания в течение 1,5 – 2,0 ч. Во время проведения испытания лампы должны быть выключены. 7.2.3 Чистоту воздуха в боксе проверяют один раз в неделю, используя аппараты, предназначенные для этих целей (аппарат Кротова и др.) или методом экспозиции чашек Петри с твердыми питательными средами (МПА, МПБ, среда Сабуро) с последующим культивированием в термостате при температуре (37 ± 1) оС в течение (24 ± 2) ч и определением количества выросших колоний и видовой принадлежности микроорганизмов (седиментационный метод). 7.2.4 Допускается применять другие методы проверки обсемененности воздуха микроорганизмами, например аспирационный метод, представляющий собой исследование проб воздуха объемом до 100 м3 посредством просасывания воздуха через фильтры с последующим выделением и высевом микроорганизмов по 7.2.3. 7.2.5 Допускается наличие не более трех колоний на чашке Петри при исследовании седиментационным методом и не более 500 КОЕ/м3 при исследовании аспирационным методом. При превышении указанных значений обсемененности воздуха в боксе работу прекращают и проводят комплекс санитарно-гигиенических мероприятий с последующим контролем микробной обсемененности воздуха. 7.3 Приготовление антисептических растворов 7.3.1 Приготовление раствора антисептола Для приготовления раствора антисептола берут раствор хлорной извести массовой долей 50 % и раствор кальцинированной соды массовой долей 5 %, сливают в равных объемах и перед применением разбавляют водопроводной водой в соотношении 1 : 50. 7.3.2 Приготовление мыльно-содового раствора Для приготовления мыльно-содового раствора берут 10 г соды, 10 г стирального порошка и 5 см3 нашатырного спирта, растворяют в 1 дм3 водопроводной воды. 7.4 Общие требования, предъявляемые к приготовлению и хранению питательных сред 7.4.1 Общие руководящие указания по обеспечению качества приготовления, а также испытанию микробиологических критериев качества, ростовых и селективных свойств питательных сред – по ГОСТ ISO 11133-1 и ГОСТ ISO 11133-2. 7.4.2 Готовить питательные среды следует строго придерживаясь приведенной рецептуры, а сухие питательные среды согласно инструкции по применению организации-производителя. Необходимый рН питательных сред устанавливают при температуре (25 ± 2) оС. Среды стерилизуют в автоклаве в течение 15 мин при температуре 121 оС, если нет других указаний в нормативном документе на конкретное лекарственное средство. 7.4.3 После стерилизации не менее 5 % пробирок или чашек от каждой партии питательной среды помещают в термостат и инкубируют в течение 14 сут, параллельно с посевом на стерильность. 7.5 Приготовление питательных сред 7.5.1 Приготовление смеси витаминов Для приготовления смеси витаминов берут 100 мг биотина, 100 мг пантотената кальция, 100 мг хлорида холина, 100 мг фолиевой кислоты, 200 мг i-Инозита, 100 мг никотинамида, 100 мг гидрохлорида пиридоксина, 10 мг рибофлавина, 100 мг гидрохлорида тиамина, смешивают в стерильных условиях и доводят объем раствора стерильной дистиллированной водой до 1000 см3. Готовую смесь стерилизуют автоклавированием в течение 10 – 15 мин при 110 оС. Используется как компонент при приготовлении среды Фрея. Срок хранения смеси витаминов в защищенном от света месте при комнатной температуре – не более 1 мес. 7.5.2 Приготовление бульона экстракта говяжьего сердца Для приготовления бульона экстракта говяжьего сердца смешивают 500 г говяжьего сердца, 10 г ферментативного пептона, 5 г хлорида натрия, доводят объем раствора дистиллированной водой до 1000 см3,стерилизуют автоклавированием в течение 15 мин при температуре 121 оС и фильтруют через ватно-марлевый фильтр. Используется как компонент для приготовления среды Хейфлика. 7.5.3 Приготовление сбалансированного солевого раствора Хэнкса (модифицированного) Для приготовления сбалансированного модифицированного солевого раствора Хэнкса берут 6,4 г хлорида натрия, 0,32 г хлорида калия, 0,08 г сульфата магния, 0,08 г хлорида магния, 0,112 г безводного хлорида кальция, 0,0596 г гидрофосфат дигидрата натрия, 0,0048 г безводного дигидрофосфата калия и доводят объем раствора дистиллированной водой до 800 см3. Стерилизуют методом мембранной фильтрации, изложенным в разделе 9. Используется как компонент для приготовления среды Фриса. 7.5.4 Приготовление бульона из экстракта сердца и мозгов Для приготовления бульона из экстракта сердца и мозгов берут 200 г экстракта мозга теленка, 250 г экстракта говяжьего сердца, 10 г ферментативного пептона, 2 г моногидрата глюкозы, 5 г хлорида натрия, 2,5 г безводного гидрофосфата натрия и доводят объем раствора дистиллированной водой до 1000 см3. Стерилизуют автоклавированием в течение 15 мин при температуре 121 оС и фильтруют через ватно-марлевый фильтр. Используется для приготовления среды Фриса. 7.5.5 Приготовление бульона РРLО Для приготовления бульона РРLО берут 50 г экстракта говяжьего сердца, 10 г ферментативного пептона, 5 г хлорида натрия и доводят объем раствора дистиллированной водой до 1000 см3. Стерилизуют автоклавированием в течение 15 мин при температуре 121 оС и фильтруют через ватно-марлевый фильтр. Используется для приготовления среды Фриса. 7.5.6 Приготовление жидкой тиогликолевой среды Для приготовления жидкой тиогликолевой среды берут 0,50 – 0,75 г L-цистеина, 0,75 г гранулированного агара массовой долей влаги не более 15 %, 2,5 г хлорида натрия, 5,0 г моногидрата глюкозы, 5,0 г водорастворимого дрожжевого экстракта, 15,0 г панкреатического гидролизата казеина, тиогликолевой кислоты, 0,3 см3 или тиогликолята натрия, 0,5 – 0,75 см3, доводят объем раствора дистиллированной водой до 1000 см3 и нагревают до полного растворения. Затем добавляют 1,0 см3 свежеприготовленного раствора резазурина натрия (1 : 1000), перемешивают и разливают в пробирки соответствующего объема. Среду автоклавируют при температуре 121 оС в течение 15 мин, рН среды после стерилизации (7,0 ± 0,2). 7.5.7 Приготовление жидкой соево-казеиновой среды Для приготовления жидкой соево-казеиновой среды берут 17,0 г панкреатического гидролизата казеина, 3,0 г гидролизата соевой муки, 5,0 г хлорида натрия, 2,5 г хлорида калия, 2,5 г калия фосфата двузамещенного, 2,5 г глюкозы, доводят объем раствора дистиллированной водой до 1000 см3 и нагревают до полного растворения. Охлаждают до комнатной температуры. Если требуется, добавляют 1 моль/дм3 раствор едкого натра, чтобы рН после стерилизации был 7,3 ± 0,2. Фильтруют для получения прозрачной среды, разливают по пробиркам и стерилизуют в автоклаве при температуре 121 оС в течение 15 мин. Для получения агаризованной питательной среды к приготовленной жидкой соево-казеиновой среде добавляют 10 – 20 г агара. 7.5.8 Приготовление жидкой среды Сабуро Для приготовления жидкой среды Сабуро в 1000 см3 дистиллированной воды добавляют 10 г сухого ферментативного пептона, кипятят в течение 10 мин, фильтруют, прибавляют 40 г глюкозы, устанавливают соляной кислотой массовой долей 1 % – 2 % рН (5,6 ± 0,2), разливают в стерильные пробирки и стерилизуют автоклавированием при температуре 121 оС в течение 15 мин. Для получения агаризованной питательной среды к приготовленной жидкой среде Сабуро добавляют 10 – 20 г агара. 7.5.9 Приготовление среды Хейфлика 7.5.9.1 Для приготовления жидкой среды Хейфлика готовят основу среды: берут 90,0 см3 бульона из экстракта говяжьего сердца, 10,0 см3 дрожжевого экстракта концентрацией 250 г/дм3, 5,0 см3 раствора фенолового красного концентрацией 0,6 г/дм3, доводят до кипения и кипятят в течении 10 мин. Среду стерилизуют автоклавированием при температуре 121 оС в течение 15 мин. 7.5.9.2 Затем основу среды охлаждают до температуры 40 о С – 45 оС и добавляют 20,0 см3 стерильной лошадиной сыворотки, не подвергнутой нагреву и проверенной на контаминацию микоплазмами, 1,20 см3 стерильного раствора дезоксирибонуклеиновой кислоты концентрацией 2 г/дм3 и 0,25 см3 пенициллина с содержанием пенициллина 20000 МЕ/см3. Значение рН доводят до 7,8 раствором едкого натра массовой концентрацией 10 %. Среду не стерилизуют. 7.5.9.3 Для приготовления твердой среды к основе жидкой среды Хейфлика по 7.5.9.1 добавляют агар в концентрации 15 г/дм3, стерилизуют автоклавированием при температуре 121 оС в течение 15 мин, охлаждают до температуры 40 о С – 45 оС, а затем добавляют компоненты по 7.5.9.2. 7.5.10 Приготовление среды Фрея Среда рекомендуется для обнаружения Mycoplasma Synovviae. Для приготовления жидкой среды Фрея смешивают 90,0 см3 бульона из экстракта говяжьего сердца, 2,0 см3 раствора моногидрата глюкозы концентрацией 500 г/дм3, 12,0 см3 свиной сыворотки, инактивированной при 56 оС в течение 30 мин, 5,0 см3 раствора фенолового красного концентрацией 0,6 г/дм3, Стерилизуют автоклавированием при температуре 121 оС в течение 15 мин, охлаждают до температуры 40 о С – 45 оС, а затем добавляют 0,25 см3 пенициллина (20000 МЕ/см3), 0,025 см3 смеси витаминов по 7.5.1, 1,0 см3 раствора β-Никотинамидадениндинуклеотда концентрацией 10 г/см3 и 1,0 см3 раствора цистеина гидрохлорида концентрацией 10 г/дм3. Значение рН среды доводят до 7,8 добавлением раствора едкого натра массовой концентрацией 10 %. Для приготовления твердой среды Фрея смешивают 90,0 см3 бульона из экстракта говяжьего сердца, 2,0 см3 раствора моногидрата глюкозы концентрацией 500 г/дм3, 12,0 см3 свиной сыворотки, инактивированной при 56 оС в течение 30 мин, 5,0 см3 раствора фенолового красного концентрацией 0,6 г/дм3, 1,4 г очищенного агара, значение рН доводят до 7,8, стерилизуют автоклавированием при температуре 121 оС в течение 15 мин, затем охлаждают до температуры 40 о С – 45 оС и добавляют 0,25 см3 пенициллина (20000 МЕ/см3), 0,025 см3 смеси витаминов, 1,0 см3 раствора β-Никотинамидадениндинуклео-тда концентрацией 10 г/см3 и 1,0 см3 раствора цистеина гидрохлорида концентрацией 10 г/дм3. 7.5.11 Приготовление среды Фриса Среда рекомендуется для обнаружения микоплазм, кроме птичьих. Для приготовления жидкой среды Фриса берут 800 см3 сбалансированного модифицированного солевого раствора Хенкса, 67 см3 дистиллированной воды, 135 см3 экстракта из сердца и мозгов, 248 см3 бульона РРLO, 60 см3 дрожжевого экстракта концентрацией 170 г/дм3, 250 мг бацитрацина, 250 мг метициллина, 4,5 см3 фенолового красного концентрацией 5 г/дм3. Среду стерилизуют автоклавированием при температуре 121 оС в течение 15 мин, затем охлаждают до температуры 40 о С – 45 оС, значение рН доводят до 7,40 – 7,45 и добавляют стерильно 165 см3 лошадиной сыворотки, 165 см3 свиной сыворотки, проверенных на контаминацию микоплазмами. Для приготовления твердой среды Фриса смешивают 800 см3 сбалансированного модифицированного солевого раствора Хенкса, 200 мг DEAE – декстрана и 15,65 мг очищенного агара. Полученную смесь стерилизуют автоклавированием в течение 15 мин при температуре 121 оС и добавляют к 1740 см3 жидкой среды Фриса. 7.6 Условия хранения питательных сред 7.6.1 Сроки и условия хранения культуральных сред – по ГОСТ ISO 11133-1. 7.6.2 Жидкие питательные среды промышленного производства, готовые к употреблению, хранят в плотно укупоренных сосудах при условии сохранения их стерильности и ростовых свойств в течение срока годности, указанного производителем. 7.6.3 Сухие питательные среды промышленного производства хранят в сухом, защищенном от света месте в соответствии с инструкцией производителя. После вскрытия упаковки необходимо написать дату вскрытия и далее хранить при комнатной температуре до окончания срока годности. По истечении срока годности, указанного производителем, среды уничтожают. 7.6.4 Приготовленные из сухих смесей и разлитые во флаконы питательные среды хранят в течение 1 мес при комнатной температуре или 3 мес при температуре от 2 оС до 8 оС. Срок годности питательных сред, разлитых в чашки Петри, составляет 7 сут при температуре 2 оС до 8 оС. 7.6.5 Если при хранении тиогликолевой среды, содержащей резазурин, верхний слой среды (более 1/3 объема) окрасится в розовый цвет, то среду можно регенерировать нагреванием на кипящей водяной бане в течение 10 – 15 мин до исчезновения розовой окраски с последующим быстрым охлаждением. Если окраска не исчезает после нагревания, то среду считают не пригодной к употреблению. Регенерацию среды можно проводить только один раз. |
Похожие:
 |
Euro-asian council for standardization, metrology and certification Еасс представляет собой региональное объединение национальных органов по стандартизации государств, входящих в Содружество Независимых... |
|
Euro-asian council for standardization, metrology and certification Еасс представляет собой региональное объединение национальных органов по стандартизации государств, входящих в Содружество Независимых... |
|
Euro-asian concil for standartization, metrology and certification Еасс представляет собой региональное объединение национальных органов по стандартизации государств, входящих в Содружество Независимых... |
|
Инструкция по обслуживанию r/4CT90-1ME/I/uaz euro 2 9242 Двигатели 4СТ90-1меа1602, 4СТ90-1меа1603 оборудованы топливным насосом Моторпаль, исполняют требования норм Euro 2 (экг №49. 02).... |
|
Инструкция по обслуживанию r/4CT90-1ME/I/uaz euro 2 9242 Двигатели 4СТ90-1меа1602, 4СТ90-1меа1603 оборудованы топливным насосом Моторпаль, исполняют требования норм Euro 2 (экг №49. 02).... |
|
Request for Taxpayer Identification Number and Certification Коммерческое обозначение/наименование организации, не являющейся юридическим лицом, если отличается от указанного выше |
 |
Организации, не являющейся юридическим лицом / Business name/disregarded... Идентификация номера и сертификации налогоплательщика / Request for Taxpayer Identification Number and Certification |
|
Зао «соломенский лесозавод» Certification Body (CB): Rainforest Alliance SmartWood Program Республика Карелия, Республика Коми, Вологодская, Архангельская, Ленинградская, Кировская области |
|
Топливо, масла и смазки ... |
|
Задача отборочного теста Целью данного теста является отбор кандидатов, владеющих английским языком на уровне Bl (Threshold) согласно классификации, принятой... |
|
1 Понятие Internet. Ресурсы Internet Под словом Internet понимается глобальная компьютерная сеть, "Сеть сетей", как часто говорят о ней. Такое понимание Internet зафиксировано... |
|
Инструкция по эксплуатации назначение Январь., Bosch 5 4, Bosch 4N., Bosch мр 0 (Euro 2,3), vs 1 Ителма, Bosch mp 7 (Bosch 80), Январь 2, а также на автомобили иж (ода),... |
|
Розничные цены в Euro, самовывозом со склада поставщика, включая ндс Рама с пескоструйной обработкой и двумя слоями порошковой краски: эпоксидная антикоррозионная грунтовка и верхний слой из полиэстер... |
|
В штате техас руководящие материалы и процесс одобрения для учреждений высшего образования Техас (Texas Higher Education Coordinating Board, thecb), Комиссией Общего Сервиса / Офисом Сбережения энергии штата (General Services... |
|
Поддержка Агентств Поддержки мб и Центров Деловой Информации в Российской... Данный Отчет был составлен ramb0ll cna veneto Euro-ln Consulting Консорциум в рамках Проекта Tacis smerus 9602 "Поддержка Агентств... |