Скачать 290.77 Kb.
|
Задание 3. В опытах на животных изучить изменения количественного и качественного состава лейкоцитов. О п ы т 1. Моделирование лейкоцитоза у кролика. М а т е р и а л ь н о е о с н а щ е н и е: клетки для кроликов (4); кюветы (4); микроскопы (15); смесители для лейкоцитов (15); камеры Горяева (15); шприцы на 5 мл с иглой (2); предметные стекла (26); жидкость Тюрка (28 мл); кипяченое молоко (5 мл); краска Романовского (50 мл); 0,9%-ный раствор натрия хлорида (10 мл); 70%-ный раствор этилового спирта (20 мл); кедровое масло (3 мл); подопытные животные: кролики (4). П о с т а н о в к а о п ы т а. Берут двух однополых кроликов массой 1,8-2,5 кг, предварительно выдержанных 24 ч на голодной диете. Первому кролику в стерильных условиях внутрибрюшинно вводят 5 мл кипяченого молока, разведенного 1:1 изотоническим раствором натрия хлорида. Второму кролику в брюшную полость вводят 5 мл стерильного изотонического раствора. Спустя 45-60 мин проводят гематологическое обследование обоих кроликов: определяют число лейкоцитов, лейкограмму, лейкоцитарный профиль, индекс регенерации. Определение числа лейкоцитов. Выстригают, обезжиривают, дезинфицируют край уха кролика. Прокалывают иглой кожу и стенку ушной боковой вены. Первые капли крови удаляют, из последующих капель насасывают кровь в смеситель (меланжер) для лейкоцитов до метки 0,5, вытирают кончик смесителя ваткой, опускают в стаканчик с жидкостью Тюрка (4%-ный раствор ледяной уксусной кислоты – 100 мл, 1%-ный раствор метиленового синего или генциана фиолетового – 1 мл) и насасывают до отметки 2. Покачивают смеситель в течение 2-3 мин. За это время уксусная кислота лизирует эритроциты и окрашиваются ядра лейкоцитов. Первые 2-3 капли из смесителя удаляют, четвертой заполняют подготовленную счетную камеру Горяева. Под малым увеличением подсчитывают все клетки, расположенные в 100 больших квадратах. При подсчете числа лейкоцитов исходят из того, что разведение крови в смесителе 1:20, объем счетной камеры над маленьким квадратом 1/4000 мкл, а в одном большом квадрате сетки Горяева 16 маленьких, следовательно, объем над одним большим квадратом будет 16/4000 мкл, а над 100-1600/4000 мкл. Например, в 10 больших квадратах найдено 154 лейкоцита, тогда в 1 мкл крови их будет 154 · 4000 · 20 ------------------ = 154 · 50 = 7700. 1600 Для простоты расчетов число лейкоцитов, найденное в 100 больших квадратах, надо умножить на 50, чтобы получить их количество в 1 мкл крови. Для определения числа лейкоцитов в 1 л крови (Х) используют формулу Х = А · 5 · 10 в седьмой степени, где А – число лейкоцитов, найденных в 100 больших квадратах. Получают величину Г/л, где Г – гига, равна 10 в девятой степени. Определение лейкоцитарной формулы (лейкограммы). Готовят мазок крови, высушивают, фиксируют, окрашивают. Закрепляют в препаратоводителе и помещают под иммерсионный объектив. На четыре краевых участка наносят по капле кедрового масла. Один из краевых участков устанавливают в поле зрения. Подсчитывают лейкоциты способом меандров в четырех условных зонах (рис. 35), разделенных поперечной и продольной осевыми линиями, визуально проведенными через центр мазка. В каждой зоне надо сосчитать 25% клеток от требуемого количества (100 или 200). Препаратоводителем перемещают мазок в зоне таким образом, чтобы, продвинувшись на 3-4 поля зрения в глубину мазка, поменять направление приблизительно на два поля зрения в сторону по длине препарата, а затем снова возвращаются к краю мазка. Дойдя до края, снова передвигают его на два поля зрения в сторону по длине препарата, затем возвращаются опять в глубину мазка и т.д. Насчитав 25 (50) клеток белой крови, исследуют второй участок мазка, затем третий и четвертый. Такая методика счета исключает случайные ошибки, связанные с неравномерностью распределения различных форм по мазку. Найденные и идентифицированные клетки регистрируют с помощью 11-клавишного механизма счетчика (рис. 36), что значительно облегчает и ускоряет исследование. При анализе мазков крови, во время подсчета лейкограммы, обращают внимание на морфологические особенности лейкоцитов. Патологические формы нейтрофилов могут быть выражены гиперсегментацией ядре, при которой большинство из них состоит из 4-5 и более сегментов. Гиперсегментация ядер часто сочетается с макроцитозом нейтрофильных лейкоцитов. В нейтрофилах обнаруживают также токсическую зернистость протоплазмы, вакуолизацию цитоплазмы и ядра, пикноз (сморщивание) и гипохроматоз ядер, наличие в протоплазме базофильной пунктации – телец Князькова-Деле. Иногда можно встретить распадающиеся клетки (цитолиз) или распадающиеся ядра (кариорексис), ядерные сегменты, не связанные между собой мостками. Патологически измененные формы эозинофилов отличаются от нормальных неравномерным распределением хроматина в ядре, его гиперсегментацией, наличием в цитоплазме овальных гранул или гранул, окрашенных в красно-фиолетовый цвет. Патологические формы лимфоцитов характеризуются вакуолизацией протоплазмы, неравномерным окрашиванием ядер, разрыхленностью их субстанции. Патологическим формам моноцитов свойственны диффузное серое, с желтоватым оттенком окрашивание протоплазмы, наличие в ней вакуолей, полиморфное разрыхленное ядро со слабоокрашенными или неокрашенными участками. Определение лейкоцитарного профиля. Подсчитав число лейкоцитов в 1 мкл крови у контрольного и подопытного кроликов, и зная процентное соотношение элементов белой крови (лейкоцитарная формула), высчитывают их абсолютное количество в заданном объеме. Например, у контрольного кролика в 1 мкл найдено 6500 лейкоцитов, лейкоцитарная формула выведена в следующем виде (%): Б-1, Э-2, П-7, С-36, Л-52, М-2. Принимая общее число лейкоцитов за 100%, находим, что в 1 мкл крови базофилов будет 65, эозинофилов – 130, палочкоядерных нейтрофилов – 455, сегментоядерных нейтрофилов – 2340, лимфоцитов – 3380, моноцитов – 130. Определение индекса регенерации (ядерного сдвига). Этот показатель представляет собой отношение суммы молодых форм нейтрофилов к зрелым. Вычисляют индекс по формуле %М+%Ю+%П ------------------- . %С По индексу регенерации можно судить о возрастном составе нейтрофилов. Увеличение этого показателя свидетельствует об активации миелопоэза, снижении его ингибиции. Изучив количественный и качественный состав элементов белой крови у здорового и подопытного кроликов, сопоставляют и анализируют полученные данные. О ф о р м л е н и е п р о т о к о л а о п ы т а. Кратко записывают использованные методы гематологического обследования и полученные результаты. Объясняют механизм развития лейкоцитоза при экспериментальном асептическом перитоните. Делают выводы. О п ы т 2. Моделирование лейкопении у кролика. М а т е р и а л ь н о е о с н а щ е н и е: клетки для кроликов (4); кюветы (4); микроскопы (15); предметные стекла (30); шлифованные стекла (30); камеры Горяева (15); смесители для лейкоцитов (15); шприцы на 5 мл с иглой (2); бензол (6 мл); изотонический раствор натрия хлорида (10 мл); подопытные животные: кролики (4). П о с т а н о в к а о п ы т а. Берут двух однополых кроликов массой более 2 кг. Одному кролику за 7-9 дней до занятий ежедневно в течение 6-7 дней подкожно вводят бензол из расчета 1 мл на 1 кг массы тела, второму – изотонический раствор натрия хлорида. В день занятий обоих животных помещают в клетки, состригают шерсть напротив боковой вены уха, обезжиривают, протирают спиртом, прокалывают кожу и стенку сосуда. Первые капли снимают ваткой, последующие используют для определения числа лейкоцитов и взятия мазков. Количество лейкоцитов подсчитывают в камере Горяева. При микроскопировании окрашенных мазков выводят лейкограмму. Бензольное отравление приводит к поражению костно-мозговой ткани, сопровождающемуся агранулоцитозом, тромбоцитопенией, снижением числа эритроцитов и содержания гемоглобина в крови. Сопоставляя показатели белой крови, полученной от контрольного и подопытного кроликов, выявляют характер и степень отклонений от нормы, вызванных введением бензола в организм. О ф о р м л е н и е п р о т о к о л а о п ы т а. Записывают способ моделирования лейкопении. Результаты проведенного исследования вносят в таблицу 21. Таблица 21. Показатели белой крови у контрольного и подопытного кроликов
Анализируют полученные данные. Делают выводы. О п ы т 3. Выведение и оценка лейкограмм у животных, больных лейкозом. М а т е р и а л ь н о е о с н а щ е н и е: микроскопы (15); мазки крови (15); иммерсионное масло (2 мл). П о с т а н о в к а о п ы т а. Студентам выдают подготовленные к микроскопированию мазки крови, полученной от животных разных видов, больных миелоидным или лимфоидным лейкозом в период развернутой клинической стадии болезни. Препараты просматривают под иммерсией, по четырехпольной системе. В мазках крови отыскивают и дифференцируют различные формы лейкоцитов. Регистрацию числа каждого вида клеток белой крови, обнаруженных при исследовании мазков, проводят на клавишном механическом счетчике. Миелоидный лейкоз характеризуется пролиферацией красного костного мозга, селезенки, множественными экстрамедуллярными очагами кроветворения. В периферической крови преобладают миелобласты, промиелоциты, миелоциты, метамиелоциты (юные). Миелобласты – крупные клетки с ядрами круглой формы, хроматин ядра представляет собой тонкую равномерную сеточку с мелкими узловатыми утолщениями. В ядре четко видны несколько ядрышек. Количество протоплазмы невелико, она базофильна, зернистость отсутствует. Промиелоциты – крупные клетки, протоплазма менее базофильна, чем у миелобласта, в ней появляется зернистость, ядрышки в ядре обнаруживают не всегда. Миелоцит – клетка с зернистой протоплазмой, зернистость крупная, эозинофильная, базофильная, нейтрофильная. Ядро круглое, ядрышки в нем отсутствуют. Метамиелоцит (юный) по сравнению с миелоцитом, промиелоцитом, миелобластом меньших размеров. Ядро компактное, почкообразное, с вдавливанием с одной стороны, что характерно для этой клетки. В протоплазме выражена эозинофильная или нейтрофильная зернистость. Лимфоидный лейкоз отличается преимущественной пролиферацией лимфоидной ткани. Для его диагностики наряду с другими приемами используют гематологический метод, основанный на обнаружении существенного повышения в периферической крови числа слабодифференцированных лейкоцитов, преимущественно лимфоидного ряда. При выведении и анализе лейкоцитарной формулы обращают внимание на процентное соотношение отдельных форм лейкоцитов, степень их дифференцировки, появление в крови полиморфных, атипичных клеток кроветворных органов. Проведя анализ мазков, и получив лейкограммы, устанавливают, какой вид лейкоза был у больных животных. О ф о р м л е н и е п р о т о к о л а о п ы т а. Записывают все данные о животном, от которого получен мазок крови для исследования. Результаты подсчета лейкоцитарной формулы вносят в таблицу. Определяют, какие нарушения кроветворения произошли у больного животного. Делают выводы о виде лейкоза. ЗАДАНИЯ ДЛЯ САМОПОДГОТОВКИ И КОНТРОЛЯ ЗНАНИЙ 1.Функции крови и возможные их нарушения. 2.Изменение объема циркулирующей крови. 3. Гемотрансфузионный шок. 4.Анемия. Определение понятия. 5.Классификация анемий по цветовому показателю. 6.Классификация анемий по патогенезу и функциональной активности миелоидной ткани и типу эритропоэза. 7.Железо- и белково-дефицитные анемии. 8.Анемии, вызванные дефицитом внешнего и внутреннего антианемического фактора. 9.Патологические формы эритроцитов. 10.Нарушения функций и компенсаторные механизмы при острой постгеморрагической анемии. 11.Зависимость эритропоэза от состояния микрофлоры рубца жвачных животных. 12.Лейкоцитоз. Определение понятия, виды. 13.Нейтрофильный лейкоцитоз. 14.Понятие о сдвиге ядра при нейтрофилии, его диагностическое значение. 15.Эозинофилия. 16.Лимфоцитоз. 17.Лейкопения. 18.Агранулоцитоз. 19.Лейкоз. 20.Этиология лейкозов (современные теории). 21.Этиология и патогенез лейкоза крупного рогатого скота. 22.Классификация лейкозов. 23.Микроскопическая картина периферической крови при острых лейкозах. 24.Состояние иммунологической реактивности при лейкозах. 25. Лейкемоидные реакции. 26. Тромбоцитопения и тромбоцитоз. 27.Замедление свертываемости крови. 28.Гиперкоагуляция крови, ее механизмы. 29.Гемолиз эритроцитов, его признаки и последствия. 30.Изменение скорости оседания эритроцитов (СОЭ). 31.Изменение биохимического состава крови. 32.Причины и последствия образования метгемоглобина и карбоксигемоглобина в крови с/х животных. ЗАДАЧИ 1.После тяжелых патологических родов с силовым извлечением плода из родовых путей у коровы появились следующие признаки: частота дыхания 51 в 1 мин, животное дышит тяжело, с открытым ртом, пульс 94 удара в 1 мин слабого наполнения, видимые слизистые оболочки бледные, температура тела 36,7ºС. Какой вид анемии развился у животного? Каков прогноз? 2.Лошадь в феврале разорвала небрежно хранившийся мешок с молотым натрия хлоридом и съела несколько сот граммов его. Какие изменения состава крови возникнут у этого животного? Как их предупредить? 3.У 1,5-месячного теленка в течение 6 дней наблюдали диарею. Какой формой гиповолемии он страдает? 4.При диспансеризации стада коров у одного животного при гематологическом обследовании обнаружили следующую картину крови: содержание эритроцитов – 5,4 Т/л (5,4 · 10 в двенадцатой степени/л), гемоглобина – 5,8 ммоль/л (94 г/л); гематокрит – 0,38 л/л; СОЭ – 18,5 мм/24 ч; содержание лейкоцитов – 216 Г/л (216 · 10 в девятой степени/л); лейкограмма: базофильных гранулоцитов – 0,5%, эозинофильных гранулоцитов – 2,5, палочкоядерных нейтрофильных гранулоцитов – 3, сегментоядерных нейтрофильных гранулоцитов – 5,5, лимфоцитов – 87, моноцитов – 1,5%. Какая патология системы крови у коровы? 5.В первой и второй стадиях лихорадки, индуцированной автоклавированной культурой стафилококка, число лейкоцитов у подопытной свиньи составляло 2,7-3,4 Г/л (2,7-3,4 · 10 в девятой степени/л), а лейкограмма имела следующий вид: базофильных гранулоцитов – 0,5%, эозинофильных гранулоцитов – 4,5, палочкоядерных нейтрофильных гранулоцитов – 2, сегментоядерных нейтрофильных гранулоцитов – 11,5, лимфоцитов – 75,5, моноцитов – 6%. Как назвать обнаруженные изменения состава крови и как объяснить их механизм? 6.При гематологическом обследовании больной собаки в возрасте одного года (клинические признаки – плохой аппетит, вялость, истощение, повышенная утомляемость) была выведена следующая лейкоцитарная формула: базофильные гранулоциты – 0,5%, эозинофильные гранулоциты – 12, палочкоядерные нейтрофильные гранулоциты – 4, сегментоядерные нейтрофильные гранулоциты – 44, лимфоциты – 36, моноциты – 3,5%. Общее число: лейкоцитов – 11,4 Г/л (11,4 · 10 в девятой степени/л), эритроцитов – 4,7 Т/л (4,7 · 10 в двенадцатой степени/л. Вычислить лейкоцитарный профиль, определить характер гематологических сдвигов, сделать предположение о причине нарушений системы крови. 7.Какие изменения находят в лейкограмме при остром гнойном воспалении и хроническом течении инфекционного процесса (туберкулез)? 8.В результате гематологического обследования лошади, находящейся на стационарном излечении по поводу ожоговой болезни, получены следующие результаты: содержание эритроцитов – 7,2 Т/л; Hb – 7,6 ммоль/л (122 г/л); цветовой показатель – 1,1; гематокрит – 0,41 л/л; содержание лейкоцитов – 13,1 Г/л; лейкограмма: базофильные гранулоциты – 0%, эозинофильные гранулоциты – 3, миелоциты – 2, метамиелоциты (юные) – 2, палочкоядерные нейтрофильные гранулоциты – 7, сегментоядерные нейтрофильные гранулоциты – 56; лимфоциты – 22, моноциты – 8%. О чем свидетельствуют данные этого обследования? 9. При выборочном гематологическом обследовании стада коров по поводу снижения удоев при даче рациона с большим количеством силоса и концентратов, но малом количестве сена результаты анализа крови были следующими: содержание лейкоцитов – 6,8-7,7 Г/л, эритроцитов – 3,2-4,7 Т/л; гемоглобина – 4,2-4,6 ммоль/л (67-74 г/л); СОЭ – 0,5-0,7 мм/ч; цветовой показатель – 1,3-1,6. При микроскопировании мазков обнаруживали гиперхромные эритроциты, мегалобласты, пойкилоциты, мегалоциты с тельцами Жолли. Какая патология системы крови у стада коров? Каковы вероятные причины и генез ее возникновения? 10.В ветеринарную лечебницу доставлена корова с признаками гемоглобинурии. Какую патологию крови можно предполагать у больного животного? Как убедиться в правомерности предположения? 11.У лошади глубокая колотая рана, осложненная гнойной кокковой инфекцией. Какие изменения могут быть обнаружены в лейкограмме при гематологическом обследовании животного? ТЕМЫ РЕФЕРАТОВ 1.Этиология и патогенез лейкоза крупного рогатого скота. 2.Этиология и патогенез железодефицитных анемий у животных разных видов. 3.Роль антианемического вещества (фактора Касла) в патогенезе анемий. ЛИТЕРАТУРА Карпуть И.М. Гематологический атлас с/х животных. – Минск: Ураджай, 1986. Кудрявцев А.А., Кудрявцева Л.А. Клиническая гематология животных. – М.: Колос, 1974. Лейкозы и злокачественные опухоли животных /Под ред. В.П.Шишкова, Л.Г.Бурбы. – М.: Агропромиздат, 1988. Леонова Е.В. Патологическая физиология системы крови. – Минск: Ураджай, 1988. Нахмансон В.М. Лейкоз крупного рогатого скота. – М.: Россельхозиздат, 1986. Проблемы лейкоза животных /Под ред. П.Н.Смирнова. – Новосибирск, 1992. Симонян Г.А., Хисамутдинов В.В. Ветеринарная гематология. – М.: Колос, 1995. |
Рабочая программа дисциплины по дисциплине «Патологическая физиология» Дисциплина «Патологическая физиология» относится к циклу Математических, естественно-научных и медико-биологических дисциплин Федерального... |
Методические указания для самостоятельной работы по дисциплине «патологическая физиология» Цель методических указаний – повышение теоретической подготовки студентов по дисциплине «Патологическая физиология» за счет активизации... |
||
Рабочая программа дисциплины Дисциплина «Патологическая физиология» относится к циклу базовых математических, естественнонаучных дисциплин по специальности «Лечебное... |
Рабочая программа дисциплины патологическая анатомия, клиническая... Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования |
||
Возрастная физиология Безрукиз М. М., Сонькин В. Д., Фарбер Д. Л. Возрастная физиология: учебное пособие для студенов высш учеб завед М: Наука, 2002г |
Особенности учета донорской крови и расчетов с донорами в отделениях... Многие больницы имеют в своем составе отделения переливания крови. Существуют также специализированные станции переливания крови |
||
Особенности учета донорской крови и расчетов с донорами в отделениях... Многие больницы имеют в своем составе отделения переливания крови. Существуют также специализированные станции переливания крови |
Программа дисциплины экологическая физиология животных новосибирск Курс «Экологическая физиология» реализуется в рамках специальности «биология – 0611Б». Относится к специальным дисциплинам вузовской... |
||
Инструкция по заготовке и консервированию донорской крови (в ред... Заготовка крови от доноров осуществляется с учетом необходимости удовлетворения потребности лечебно-профилактических учреждений здравоохранения... |
Инструкция по применению компонентов крови общие положения Переливанием... ... |
||
Инструкция по применению компонентов крови общие положения Переливанием... В целях совершенствования медицинской помощи населению Российской Федерации и обеспечения качества при применении компонентов крови... |
Инструкция по применению компонентов крови общие положения Переливанием... В целях совершенствования медицинской помощи населению Российской Федерации и обеспечения качества при применении компонентов крови... |
||
Инструкция по применению компонентов крови общие положения Переливанием... В целях совершенствования медицинской помощи населению Российской Федерации и обеспечения качества при применении компонентов крови... |
Крови в учреждениях службы крови рсфср В 1988-1989 гг в службе крови рсфср зарегистрировано 3 случая осложнений после крово- и плазмодачи, закончившихся летально |
||
А. Е. Хомутов физиология высшей нервной деятельности Хомутов А. Е. Физиология высшей нервной деятельности: Учебник для студентов биологических вузов. Н. Новгород: Изд-во ннгу, 2015.... |
Бухгалтерский учет донорской крови В статье рассмотрены вопросы бухгалтерского учета донорской крови в учреждениях здравоохранения, документальное оформление операций,... |
Поиск |