Скачать 1.15 Mb.
|
Глава 2. ФЕРМЕНТЫ2.1. Строение и механизм действия 1. Высокая специфичность РНКазы А может быть четко продемонстрирована при сравнении ряда параметров гидролиза РНК РНКазой и 1 М щелочью (в скобках): 1) основание, находящееся на 3’-конце, должно быть пиримидином Ura или Thy (все); 2) анти-конформация Ura или Thy относительно кольца рибозы (и син-, и анти-); 3) расщепление только 3’-5’-фосфодиэфирных связей (и 3’-5’-, и 2’-5’-); 4) продуктом является только 3’-нуклеотид (и 3’- и 2’-); 5) время превращения 2’,3’-циклофосфата на 3 порядка меньше для РНКазы; рН 6-8 реакционной смеси (рН 12–14). 2. 3-фосфоглицерат 2-фосфоглицерат (фосфоглицератмутаза) (1), 3-фосфоглицерат + ATP 2,3-дифосфоглицерат + ADP (фосфоглицераткиназа) (2), E-His (фосфоглицератмутаза) + 2,3-дифосфоглицерат Е-His-p + 2 фосфоглицерат, 3-фосфоглицерат + E-His-p 2,3-фосфоглицерат + E-His 2 фосфоглицерат + E-His-p. Поскольку фосфорилированная форма фермента (Е-His-p) нестабильна и подвергается гидролизу до свободного фермента (Е-His) и неорганического фосфата, существует реакция (2), катализируемая киназой, которая обеспечивает генерирование 2,3 дифосфоглицерата, фосфорилирующего свободный фермент, образующийся при гидролизе фосфофермента. 3. Глюкоза + АТР глюкозо-6-фосфат + ADP. Глюкокиназа имеет гораздо большую КМ для глюкозы, чем гексокиназа. При голодании печень возвращает глюкозу в кровь, прежде всего для снабжения ею мозга и эритроцитов. Первой реакцией при захвате глюкозы клетками мозга и печени является фосфорилирование глюкозы. Более низкое сродство глюкокиназы к глюкозе по сравнению с гексокиназой приводит к тому, что печень не конкурирует с мозгом за сахар крови. Печень эффективно усваивает глюкозу, только когда ее уровень в крови высок. Поскольку этот фермент не ингибируется глюкозо-6-фосфатом как гексокиназа, он может захватывать глюкозу и синтезировать гликоген даже при высоком уровне внутриклеточного глюкозо-6-фосфата. 4. У эукариот: ацетат + АТР ацетиладенилат + пирофосфат; ацетиладенилат + CоА ацетилCоА + АMР. У прокариот: ацетат + АТР ацетилфосфат + ADP (ацетаткиназа); ацетилфосфат + CоА ацетилCоА + ортофосфат (S ацетилтрансфераза). 2.2. Кинетика ферментативных реакций. Ингибирование 1. а) 31,1×10-6 моль; б) 5×10-8 моль; в) 622 с-1. 2. КМ=0.85 М, k2=0.25×10-10 М2×с-1. 3. а) Да. КМ=5,2×10-6 М; б) Vmax= 6,84×10-10 моль; в) 337 с-1. 4. КМ =1.1 mМ, k2=0.1410-10 М2с-1. 5. I50=( 1 + КМ/[S])/( 1 - КМ/[S]). 6. КМ=10 мкМ, Vmax= 45.5 мкM/мин, конкурентное, ki =5.4 мкМ. 7. КМ=35 мкМ. 8. КМ=3.4 мМ, Vmax= 0.8 мкM/мин, конкурентное, ki =22 мМ. 9. КМ=1.0 мМ, конкурентное, ki,ср = 1.68 мМ. 10. КМ=2.41 мМ, неконкурентное, ki =24 мМ. 11. КМ=20 мМ, бесконкурентное, ki =4.2 мМ. 12. E-CH2OH + глюкозо-1,6-дифосфат E-CH2Op + глюкозо-6-фосфат E-CH2OH + диизопропилфторфосфат E-CH2O-диизопропилфосфат + HF Образовавшееся диизопропилфосфатное производное фермента не гидролизуется и фермент перестает работать. К этому яду чувствительны все ферменты, имеющие в активном центре остаток серина, а именно, сериновые протеазы ( трипсин, химотрипсин), фосфорилаза, пируватдегидрогеназа. 2.3. Классы ферментативных реакций. Кофакторы и коферменты 1. а) Гидролаза катализирует расщепление связи под действием воды (класс 3), гидратаза – отщепление воды от оксисоединений с образованием двойной связи или присоединение по двойной связи (класс 4); б) фосфатаза катализирует отщепление фосфатных остатков под действием воды, фосфорилаза – расщепление связей под действием фосфата; в) экзопептидаза расщепляет пептидные связи концевых аминокислот, эндопептидаза гидролизует пептидные связи внутри полипептидной цепи; г) трипсин разрывает пептидные связи, СО-группа которых принадлежит основным аминокислотам Lys и Arg, а химотрипсин – ароматическим аминокислотам ( Phe, Tyr, Trp); д) трипсиноген – неактивный предшественник трипсина (см. пункт «г»). 2. а) D-глюкозо-1- фосфат фосфогидролаза, глюкозо-1-фосфатаза, ЕС 3.1.3.10. б) Ацетил-СоА: ортофосфат ацетилтрансфераза, фосфат-ацетилтрансфераза, ЕС 2.3.1.8. в) Метионинрацемаза, метионинрацемаза, ЕС 5.1.1.2. г) Ацетат: СоА-лигаза (образующая АМР), ацетил-СоА-синтетаза, ЕС 6.2.1.3. д) АТР: креатин-N-фосфотрансфераза, креатинкиназа, ЕС 2.7.3.2. 3. а) L-лактат + NAD+ = пируват + NADН, лактатдегидрогеназа, ЕС 1.1.1.27. б) АТР = 3' : 5' – циклический АМР + пирофосфат, аденилатциклаза, ЕС 4.6.1.1; в)АТР + L-аланин +тРНКала = АМР + пирофосфат + L-аланил-тРНКала, аланил-тРНК-синтетаза, ЕС 6.1.1.7. г) UDP-глюкоза + D-фруктозо-6-фосфат = UDP + сахарозо-6-фосфат, сахарозофосфатсинтаза, ЕС 2.4.1.14. 4. -Кетоизовалериат + формиат + аланин + цистеин + NADPН + +Н+ + 4АТР + СТР CоА + NADP+ + CDP + 2ADP + АМР + 4НРО4-2. 5. г. 6. д. Глава 3. Биоэнергетические процессы. генерирование и хранение метаболической энергии 3.1. Общие 1. 1.1. Матрикс; межмембранное пространство. 1.2. Наружная. 1.3. Кристы. 1.4. Триацилглицеролы (триглицериды). 1.5. Гликоген. 1.6. Цикл лимонной кислоты. 1.7. Окислительное фосфорилирование. 1.8. Электрохимический протонный градиент. 1.9. Протон движущая. 1.10. АТР-синтетаза. 1.11. АТР-синтетаза. 1.12. Цитохромы. 1.13. Железосерный центр. 1.14. Хиноны. 1.15. Ферментные комплексы дыхательной цепи. 1.16. Комплекс NADH-дегидрогеназы. 1.17. Комплекс b-c1. 1.18. Комплекс цитохромоксидазы. 1.19. Сопряженные окислительно-восстановительные пары. 1.20. Редокс-потенциал (окислительно-восстановительный потенциал). 2. 2.1. Неправильно. Клетки животных запасают "горючее" в форме жиров (содержащих жирные кислоты) и гликогена (построенного из глюкозы). 2.2. Правильно. 2.3. Неправильно. При транспорте электронов протоны выкачиваются из митохондриального матрикса в межмембранное пространство. 2.4. Правильно. 2.5. Правильно. 2.6. Неправильно. Легче протекают реакции с отрицательным значением ∆G, т. е. те, которые сопровождаются уменьшением свободной энергии. 2.7. Правильно. 2.8. Неправильно. АТР-синтетаза представляет собой ферментный комплекс с обратным действием. Направление его действия зависит от соотношения между величинами электрохимического протонного градиента и локального ∆G для гидролиза АТР. 2.9. Неправильно. Хотя в большинстве белков дыхательной цепи роль переносчиков электронов выполняют атомы железа, однако в одном белке в этом качестве выступает молекула флавина, а в двух белках – атомы меди. 2.10. Правильно. 2.11. Правильно. 3.2. Окисление углеводов 3.2.1. Гликолиз 1. 1-С. 2. Фруктозо-6-фосфат + 3ADP + 2рi + 2NAD+ 2 пируват + + 3АТР + 2NADH + 2Н+ + 2Н2О; 1-С. 3. Если в клетках окисление глюкозы идет по гликолитическому пути, а затем через ЦТК, то метка должна появляться в молекулах СО2 в обоих вариантах одновременно. Если идет через фосфоглюконатный путь, то метка будет появляться в СО2 сначала только в опыте с 1-14С-глюкозой. 4. Д-глицеральдегид-3-фосфат + рi + 2ADP этанол + 2АТР + + СО2 + Н2О . 5. Глюкоза + 2рi + 2ADP 2 этанол + 2АТР + 2 СО2 + 2Н2О. 6. в. 7. в. 8. Углерод метильной группы пирувата метится 14С. 9. Глицерин + NAD+ + Pi + ADP → Пируват + АТР + 2NADН + + Н+ + Н2О. Глицеринкиназа и глицерофосфат дегидрогеназа. 3.2.2. Альтернативный путь окисления глюкозо-6-фосфата 1. С-1 эритрозо-4-фосфата, С-2 фруктозо-6-фосфата, C-2 и C-4 седогептулозо-7-фосфата. 2. В клетках печени, в жировых клетках, везде, где требуется много NADPH для синтеза и рибозо-5-фосфата для синтеза нуклеотидов. 3. В окислительной стадии глюкозо-6-фосфат превращается в рибозо-5-фосфат с выделением СО2. Если учесть, что из шести молекул глюкозо-6-фосфата образуется шесть молекул рибозо-5-фосфата, из которых может ресинтезироваться пять молекул глюкозо-6-фосфата, тогда в суммарном уравнении будут фигурировать 6 молекул СО2, т. е. на бумаге это выглядит как окисление молекулы глюкозы. В действительности одна молекула глюкозо-6-фосфата не преобразуется в 6 молекул СО2. 3.3. Цикл трикарбоновых кислот 1. а. 2. Нет, не будет происходить накопления оксалоацетата, так как два атома углерода теряются в цикле на двух стадиях декарбоксилирования. 3. а) Метка уходит с СО2; б) и г) после одного оборота ЦТК метка появляется в С-1 и С-4 оксалоацетата; в) и д) после одного оборота ЦТК метка появляется в С-2 и С-3 оксалоацетата. 4. – 41 кДж/моль. 5. 0,90, 0,03 и 0,07. 3.4. Цепь переноса электронов 1. а) NADH + Н+ + 1/2 О2 + 2ADP + 2рi NAD++ 2АТР + 3Н2О; б) NADH + Н+ + 1/2 О2 + 3ADP + 3 рi NAD+ + 3АТР + 4Н2О. 2. Фосфорилирование на субстратном уровне – это синтез NTP, когда на NDP переносится “высокоэнергетическая” фосфорильная группа, ковалентно связанная с субстратом (например, глицеральдегид-3-фосфата). Разобщающие агенты (2,4 динитрофенол, салициланилиды, антибиотики) нарушают сопряженное фосфорилирование, не влияя на субстратное. 3. а) 15; б) 12; в) 19; г) 21; д) 15; е) 3; ж) 38; з) 36. 4. При окислении образуется 49 молекул АТР, при синтезе расходуется 58 молекул АТР. 5. Цианид приводит к летальному исходу в результате связывания его с ферриформой цитохрома (а + а3), что вызывает подавление окислительного фосфорилирования. Нитрит превращает феррогемоглобин в ферригемоглобин, который также связывает цианид. Таким образом, ферригемоглобин конкурирует с цитохромом (а + а3) за связывание с цианидом. Так как количество ферригемоглобина, которое образуется без нарушения транспорта кислорода, значительно превышает количество цитохрома (а + а3), эта конкуренция обеспечивает лечебное действие. 3.5. Окисление жирных кислот 1. а) Миристиновая кислота + 7CоА + 6О2 + 30ADP + 28рi 7ацетилCоА + 29АТР + АМР + 35Н2О; б) миристиновая кислота + 20О2 + 114ADP + 112рi 14СО2 + + 113АТР + АМР + 126Н2О. 2. Пропионовая кислота + 3.5О2 + 29ADP + 27рi 3 СО2 + 28АТР + АМР + 31Н2О. 3. а) С-1 и С-4; б) С-1 и С-4; в) С-1. 4. а) н-Гептановая кислота + 9.5О2 + 63ADP + 61рi 7СО2 + + 62АТР + АМР + 68 Н2О; б) Пальмитиновая кислота + 8CоА + 7О2 + 35ADP + 33рi 8ацетилCоА + 34АТР + АМР + 42Н2О. 5. Пальмитиновая кислота + 11 NAD+ + 11FAD + 5АТР + 4GТР + + 27 Н2О 2 глюкоза + 4СО2 + 11 NADH + 11Н+ + 11FADH2 + + 4ADP + АМР + 4GDP + 10рi. 6. в. 7. Олеиновая кислота претерпевает три цикла расщепления, катализируемые теми же ферментами, что и окисление насыщенных жирных кислот. В третьем цикле образуется цис-3-еноилСоА. Под действием изомеразы цис-3-еноилСоА превращается в транс-2-еноилСоА, и далее реакции подобны реакциям окисления насыщенных жирных кислот. Расщепление линолевой кислоты представлено на рисунке. При употреблении 1 моль линетола будет синтезироваться 127 моль АТР. 3.6. Катаболизм аминокислот. 1. а) Пируват; б) оксалоацетат; в) α-кетоглутарат; г) фенилпируват. 2. а) Оба азота , б) один карбоксил , в) концевые азоты гуанидиниевой группировки , г) концевой азот карбамоильной группировки , д) без метки, е) азот и любой из карбоксилов . 3. Рисунок 4. г. 5. 1 – С; 2 – С; 3 – С карбоксильной группы (С-1); 4 и 5 – нет. 6. б. 7. а. 3.7. Глюконеогенез 1. 2Сукцинат + 2FAD + 2GТР + 2АТР + 6Н2О глюкоза + + 2FADH2 + 2GDP + 2ADP + 4рi + 2СО2. 2. 2Пируват + 2NADH + 2Н+ + 4АТР + 2GТР + UТР + 6Н2О глюкоза + 2NAD+ + 2GDP + 4ADP + UDP + 7рi; 8 высокоэнергетических фосфатных связей. 3. Нет. Свободная глюкоза образуется только в печени и почках. 4. Глюкагон, активируя синтез своего вторичного посредника сАМР, стимулирует глюконеогенез. сАМР, одновременно с этим, активирует киназу, которая фосфорилирует пируваткиназу, вызывая тем самым ее ингибирование. В мышце адреналин увеличивает образование вторичного посредника сАМР, который стимулирует гликолиз для выработки энергии, поэтому торможение пируваткиназы здесь было бы неуместным. 5. Синтеза глюкозы de novo не происходит; имеет место перераспределение метки. Если мечена метильная группа ацетилCоА, то меченными окажутся 1, 2, 5, 6 остатки глюкозы. 3.8. Фотосинтез 1. а) Строма. б) Тилакоиды. в) Крахмал. г) Хлорофилл. д) Фотосинтетический транспорт электронов (световые); фиксация углерода темновые). е) Рибулозобисфосфат-карбоксилаза. ж) Кальвина (фиксация углерода) з) Циклическое фосфорилирование. 2. а) Правильно. б) Правильно. в) Неправильно. При возбуждении электрона в хлорофилле переносится его энергия, но не сам электрон, от одной молекулы хлрофилла к другой с помощью резонансного механизма. г) Неправильно. Перенос каждого электрона от Н2О к NADP+ требует затраты энергии двух фотонов, по одному для каждой фотосистемы. Следовательно, восстановление NADP+ до NADPН, для которого нужно два электрона, требует четырех фотонов. д) Неправильно. При циклическом фотофосфорилировании образуется только АТР (а не NADPН), и равновесие между циклическим и нециклическим фосфорилированием зависит от потребности не в АТР, а в NADPН. е) Неправильно. Непосредственно световая энергия необходима для образования О2, тогда как для фиксации СО2 световая энергия требуется лишь опосредованно. ж) Правильно. з) Правильно. 3. Это является выражением ключевого аспекта фотосинтеза – вода расщепляется светом и кислород при фотосинтезе образуется из воды. 4. Концентрация 3-фосфоглицерата повысится, а концентрация рибулозо-1,5-бисфосфата снизится. 5. Альдолаза участвует в цикле Кальвина, тогда как в пентозофосфатном пути – трансальдолаза. 6. а) С-1; б) С-3, С-4, С-5; в) С-1; г) С-1. 7. В эритрозо-4-фосфате метки нет; во фруктозо-6-фосфате мечены С-1 и С-3. |
Учебно-методический комплекс «Биохимия» 3 курс, V семестр 020201. 65 «Биология (специалист)» Учебно-методический комплекс предназначен для студентов III курса факультета естественных наук, направление подготовки 020201. 65... |
Учебно-методический комплекс «Биохимия» 3 курс, V семестр 06. 03.... Учебно-методический комплекс предназначен для студентов III курса факультета естественных наук, направление подготовки 06. 03. 01... |
||
Учебно-методический комплекс «Биохимия» 3 курс, V семестр 020201. 65 «Биология (специалист)» Учебно-методический комплекс предназначен для студентов III курса факультета естественных наук, направление подготовки 020201. 65... |
Учебно-методический комплекс немецкий язык направление 080100 экономика Учебно-методический комплекс предназначен для студентов, обучающихся по направлению Экономика и составлен согласно требованиям Федерального... |
||
Учебно-методический комплекс по мдк 01. 01. Основы управления ассортиментом... Учебно-методический комплекс предназначен для студентов 2-го курса специальности 100801 «Товароведение и экспертиза качества потребительских... |
Учебно-методический комплекс для студентов специальности 080100. 62 Данный учебно-методический комплекс предназначен для оказания помощи студентам в более эффективном освоении программы учебного курса... |
||
Учебно-методический комплекс по дисциплине «Маркетинг» Учебно-методический комплекс предназначен для студентов заочной формы обучения, содержит план лекционных и практических занятий,... |
Учебно-методический комплекс по дисциплине «Маркетинг» Учебно-методический комплекс предназначен для студентов очной формы обучения, содержит план лекционных и практических занятий, рекомендации... |
||
А. И. Низамова управление персоналом Учебно-методический комплекс предназначен для студентов Башкирской академии государственной службы и управления при изучении ими... |
Учебно-методический комплекс по дисциплине «Языки и среды реализации web -приложений» Учебно-методический комплекс предназначен для студентов заочной формы обучения, содержит план лекционных и практических занятий,... |
||
Модульная программа лекционного курса, семинаров, практикума и самостоятельной... Учебно-методический комплекс предназначен для аспирантов Института неорганической химии им. А. В. Николаева Сибирского отделения... |
Кафедра журналистики учебно-методический комплекс по курсу "организация работы пресс-службы" ... |
||
Учебно-методический комплекс по дисциплине «Гештальт-психология» Учебно-методический комплекс предназначен для бакалавров очной формы обучения, содержит учебно-тематический план, учебную программу,... |
Учебно-методический комплекс по дисциплине «Основы стилистики и риторики»... Направление — 031000. 62, направление подготовки – «Филология» Форма подготовки: Очная |
||
Учебно-методический комплекс дисциплины основы психодиагностики направление... Учебно-методический комплекс составлен на основании требований государственного образовательного стандарта высшего профессионального... |
Учебно-методический комплекс по дисциплине опд. В. 01 Современные... Настоящий учебно-методический комплекс разработан для курса по выбору «стфо: профильное обучение литературе», который изучается студентами... |
Поиск |