Утверждена «утверждаю» Генеральный директор Приказом Росздравнадзора зао «диакон-дс» От

Скачать 52.59 Kb.

Название	Утверждена «утверждаю» Генеральный директор Приказом Росздравнадзора зао «диакон-дс» От
Тип	Документы

rykovodstvo.ru > Руководство эксплуатация > Документы

УТВЕРЖДЕНА «УТВЕРЖДАЮ»

Генеральный директор

Приказом Росздравнадзора ЗАО «ДИАКОН-ДС»

От 30 октября 2009 г. № 8697-ПР/09 Шарышев А.А.

6 февраля 2009 г.

И Н С Т Р У К Ц И Я

по применению набора реагентов для определения активности аспартатаминотрансферазы в сыворотке крови человека кинетическим методом

АСПАРТАТАМИНОТРАНСФЕРАЗА ФС

РУ № ФСР 2009/04711

НАЗНАЧЕНИЕ

Набор предназначен для количественного определения активности аспартатаминотрансферазы в сыворотке крови человека в клинико-диагностических и биохимических лабораториях и научно-исследовательской практике.

Набор выпускается в двух видах фасовки и рассчитан, соответственно, на проведение 125 или 500 определений при расходе 1,0 мл рабочего реагента на один анализ.

ПРИНЦИП МЕТОДА

Аспартатаминотрансфераза катализирует в присутствии α - кетоглутарата переаминирование L-аспартата с образованием оксалоацетата. В присутствии малатдегидрогеназы и оксалоацетата происходит окисление НАДН. Скорость окисления НАДН прямо пропорциональна активности аспартатаминотрансферазы и измеряется фотометрически при длине волны 340 нм.

СОСТАВ НАБОРА

Реагент 1: буферно – ферментный раствор, содержащий трис – 80 ммоль/л, L-аспартат – 250 ммоль/л, малатдегидрогеназу – 625Е/л, лактатдегидрогеназу – 940 Е/л, азид натрия – 0,095% – 5 флаконов ( по 20 мл ) или 5 флаконов ( по 80 мл ).

Реагент 2: раствор кофактора и субстрата, содержащий НАДН – 0,75 ммоль/л, α - кетоглутарат – 50 ммоль/л, азид натрия – 0,095% – 1 флакон ( 25 мл ) или 1 флакон ( 100 мл ).

АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ

Набор обеспечивает линейную область определения активности аспартатаминотрансферазы в диапазоне от 20 Е/л до 260 Е/л, отклонение от линейности не превышает 5%. Чувствительность – не более 15 Е/л, коэффициент вариации результатов определений – не более 5%.

Качество набора можно оценивать по отечественным или зарубежным контрольным сывороткам, аттестованным данным методом. Для внутреннего контроля качества рекомендуем использовать контрольные сыворотоки TruLab N и Р фирмы DiaSys.

Нормальные величины активности аспартатаминотрансферазы составляют в сыворотке крови у женщин не более 31 Е/л, у мужчин не более 41 Е/л. Рекомендуется в каждой лаборатории уточнить диапазон значений нормальных величин для обследуемого контингента людей.

ОБРАЗЦЫ

Негемолизированная сыворотка крови. Сыворотку крови следует отделить от форменных элементов крови не позднее, чем через 1 час после забора крови.

МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ

В реагентах 1 и 2 содержится токсичный компонент – азид натрия. При работе с ними следует соблюдать осторожность и не допускать попадания на кожу и слизистые; при попадании немедленно промыть пораженное место большим количеством проточной воды. При проглатывании следует выпить 0,5 л теплой воды и вызвать рвоту.

При работе с набором следует надевать одноразовые резиновые или пластиковые перчатки, т.к. образцы крови человека следует рассматривать как потенциально инфицированные, способные длительное время сохранять и передавать ВИЧ, вирус гепатита или любой другой возбудитель вирусной инфекции.

ОБОРУДОВАНИЕ И РЕАГЕНТЫ:

–- спектрофотометр, программируемый фотометр или биохимический анализатор,

длина волны 340 нм, термостатируемая кювета с длиной оптического пути 10 мм;

–- термостат, обеспечивающий температуру + 37 ⁰ С;

–- секундомер;

–- цилиндры стеклянные мерные вместимостью 50 и 100 мл;

–- пипетки, позволяющие отбирать объемы жидкости 100 и 1000 мкл;

–- колба коническая вместимостью 200 мл;

–- 0,9% раствор NaCl ( физиологический раствор ).
ПОДГОТОВКА К АНАЛИЗУ

Приготовление рабочего реагента: смешать в колбе конической вместимостью 200 мл 4 объема реагента 1 и один объем реагента 2. Тщательно закрыть флаконы с реагентами 1 и 2 непосредственно после каждого использования.

Рабочий реагент можно хранить при температуре +2 - 8º С не более месяца или при комнатной температуре ( +18 - 25º С ) не более 5 суток.

ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА

Перед проведением анализа рабочий реагент следует нагреть до температуры +37 ± 0,5º С в течение 5 мин.

Компоненты реакционной смеси отбирать в количествах, указанных в таблице.
Таблица.

Отмерить, мкл	Опытная проба
Сыворотка крови	100
Рабочий реагент	1000

Примечание. При использовании автоматических или полуавтоматических биохимических анализаторов количество реагентов и анализируемых образцов в зависимости от объема используемой кюветы может быть пропорционально изменено (соотношение сыворотки крови к рабочему реагенту составляет 1:10 ).

Пробу перемешать и инкубировать в кювете с длиной оптического пути 10 мм при температуре +37⁰ С в течение 1 мин. Измерить оптическую плотность пробы ( Е1 ) при температуре +37⁰ С при длине волны 340 нм против воздуха, включить секундомер и через 1 минуту ( точно ) аналогично измерить оптическую плотность пробы ( Е2 ). Рассчитать изменение оптической плотности пробы в минуту:

ΔЕ/мин = Е1 – Е2.
РАСЧЕТЫ

Активность аспартатаминотрансферазы в сыворотке крови определить по формуле:

А = ΔЕ/мин х 1745,

где: А — активность аспартатаминотрансферазы, Е/л;

ΔЕ/мин — изменение оптической плотности пробы за одну минуту, ед. опт. плотн.;

1745 — фактор пересчета для выражения активности аспартатаминотрансферазы в Е/л.

Примечание. 1 Е/л = 16,67 нмоль/л/( с x л ).

Фактор пересчета следует уточнить при работе на полуавтоматических анализаторах. Для калибровки прибора рекомендуем использовать калибратор TruCal U фирмы DiaSys.

УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ НАБОРА

Хранение наборов должно производиться в темном месте при температуре +2 - 8⁰ С в упаковке предприятия - изготовителя в течение всего срока годности. Допускается хранение наборов при температуре до +25⁰ С не более 5 суток. Замораживание компонентов набора не допускается.

Срок годности наборов — 12 месяцев.

Реагенты 1 и 2 после вскрытия флаконов могут храниться при температуре +2 - 8⁰ С в темном месте в течение всего срока годности наборов при условии достаточной герметичности флаконов.

Рабочий реагент можно хранить при температуре +2 - 8º С не более месяца или при комнатной температуре ( +18 - 25º С ) не более 5 суток.

При активности аспартатаминотрансферазы в сыворотке крови более 260 Е/л (изменение оптической плотности пробы в минуту ΔЕ/мин не должно превышать 0,16) анализируемую пробу следует развести физиологическим раствором в 5 раз, повторить анализ и полученный результат умножить на 5.

Для получения надежных результатов необходимо строгое соблюдение инструкции по применению набора.

По вопросам, касающимся качества набора АСПАРТАТАМИНОТРАНСФЕРАЗА ФС, следует обращаться в ЗАО “ДИАКОН-ДС” по адресу: 142290, г. Пущино, Московской обл., ул. Грузовая 1а; тел. (495) 980-63-38, 980-63-39; т/факс (495) 980-66-79.
Директор по производству

ЗАО “ДИАКОН-ДС” В.И. Сысоева.
Зав. кафедрой клинической

лабораторной диагностики ГОУ ДПО

«РМАПО Росздрава» д.м.н. профессор В. В. Долгов. 11.03.2009 г.

Похожие:

	Утверждена «утверждаю» Генеральный директор Приказом Росздравнадзора... Набор предназначен для количественного определения триглицеридов в сыворотке или плазме крови человека ферментативным колориметрическим...		«утверждаю» Генеральный директор Закрытого акционерного общества «диакон-дс» Шарышев А. А Набор предназначен для количественного определения альбумина в сыворотке или плазме крови человека колориметрическим методом с бромкрезоловым...
	«Согласовано» «Утверждаю» Генеральный директор зао инженерный центр «Энергетика города» Договора №13/0412. 0923400. 244/15/231 между Минэнерго России и зао «Энергетика города»		«Утверждаю» Генеральный директор Закупочная документация по открытому запросу предложений на право заключения договоров для нужд зао «сск»
	«Утверждаю» Генеральный директор Закупочная документация по открытому запросу предложений на право заключения договоров для нужд зао «сск»		«Утверждаю» Генеральный директор Закупочная документация по открытому запросу предложений на право заключения договоров для нужд зао «сск»
	«Утверждаю» Генеральный директор Закупочная документация по открытому запросу предложений на право заключения договоров для нужд зао «сск»		«Утверждаю» Генеральный директор Закупочная документация по открытому запросу предложений на право заключения договоров для нужд зао «сск»
	Утверждаю генеральный директор ООО "Феникс" Специалист по тендерной работе назначается и освобождается от занимаемой должности приказом по предприятию по представлению начальника...		Утверждаю ОАО «Москапстрой» зао «Лидер-Инвест» Вице-президент Генеральный директор «П» и «РД» по новому строительству жилого домабизнес-класса с подземной автостоянкойи торгово-офисными помещениями» на месте сносимых...
	Зао «Интерфакс» утверждаю утверждаю Директор Департамента государственного регулирования в экономике Минэкономразвития России		«утверждаю» Генеральный директор зао «комита» Е. А. Федьков «01» ноября 2006 г Охраняется авторским правом России и международным авторским правом. Никакую часть этой публикации нельзя воспроизводить, копировать,...
	Реализация научных подходов при разработке дезинфицирующих средств М. К. Карабаев, директор тоо «Дезинфекционист-К», О. М. Хильченко, генеральный директор ООО «Мир дезинфекции», г. Москва, Т. В. Романова,...		Утверждаю: Генеральный директор ОАО «Название организации» Подразделение
	Утверждаю: Генеральный директор опо Командир газоспасательного пункта (гсп) опасного производственного объекта (опо) (далее командир гсп) относится к категории руководителей,...		Утверждаю: Генеральный директор ООО «Х» Старший кладовщик относится к категории младшего руководящего состава и является материально ответственным лицом, принимается на...

Руководство, инструкция по применению

Утверждена «утверждаю» Генеральный директор Приказом Росздравнадзора зао «диакон-дс» От

Отмерить, мкл

УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ НАБОРА

Похожие: