Руководство к практическим занятиям по биохимии

Скачать 1.39 Mb.

Название	Руководство к практическим занятиям по биохимии
страница	5/22
Тип	Руководство

rykovodstvo.ru > Руководство эксплуатация > Руководство

1 2 3 4 5 6 7 8 9 ... 22

2.2. Лабораторная работа: «Цветные реакции на белки и аминокислоты».

Белки — полимерные соединения, построенные из аминокислот, которые соединены между собой пептидными связями. Аминокислоты – производные карбоновых кислот, у которых три валентности -углеродного атома всегда образованы одним атомом водорода (—H), аминогруппой (—NH₂) и карбоксильной группой (—COOH). Четвертая валентность может быть образована одним атомом водорода (—Н у глицина) или группировкой атомов, называемой радикалом аминокислот (—R). В составе радикалов многие аминокислоты имеют реакционно-способные (функциональные) группы. Например:

1. Сульфгидрильная группа (—SH) у цистеина.

2. Тиометильная группа ( —S–CH₃) у метионина.

3. Гидроксильная группа (-ОН) у серина, треонина и тирозина.
Цель работы

Провести цветные реакции с двумя растворами (I и II)^¹, один из которых содержит овальбумин (яичный белок), а другой – желатину (овальбумин содержит все 20 аминокислот, а желатина только 17), и определить, в каком растворе содержится овальбумин, а в каком – желатина.
Принцип метода

Ряд химических реактивов специфически взаимодействуют (реагируют) с функциональными группами аминокислот (как свободных, так и в составе пептидов или белков) в результате чего развивается специфическое окрашивание. Такие реакции называют цветными реакциями. Интенсивность окраски в цветных реакциях пропорциональна количеству реагирующих функциональных групп. Поэтому цветные реакции могут быть использованы для качественного и количественного определения белков, для определения присутствующих в них аминокислот или для анализа состава белков.

Так, например:

биуретовой реакцией определяют наличие пептидных групп в олигопептидах и в белках (универсальная для любых белков).
нингидриновой реакцией определяют наличие -аминогрупп в свободных аминокислотах, а также в аминокислотах олигопептидов и белков (универсальная для любых белков).
ксантопротеиновой реакцией определяют наличие в белках ароматических аминокислот.
реакцией Фоля определяют наличие в составе белков серосодержащей аминокислоты – цистеина.

Студенты проводят указанные цветные реакции на 4-х предметных стеклах:

На один край каждого стекла наносят 1 каплю раствора I, на другой – раствора II

. Методики выполнения работы на предметных стёклах:

Биуретовая реакция. К белкам на первом стекле последовательно добавляют 1 каплю 10% NаOH и 1 каплю 1% CuSO₄, аккуратно перемешивая стеклянной палочкой.

Нингидриновая реакция. К белкам на втором стекле добавляют 1 каплю раствора нингидрина. Перемешивают. Осторожно нагревают до кипения.

Ксантопротеиновая реакция. К белкам на третьем стекле добавляют 1 каплю концентрированной HNO₃. Перемешивают. Осторожно нагревают.

Реакция Фоля. К белкам на четвертом стекле добавляют 1 каплю 30% NaOH и 1 каплю (CH₃OO)₂Pb. Нагревают до кипения.

Выполнение работы в пробирках

Реакция	№ пробирок	Ход определения для реакций, протекающих в пробирках	Окраска	Чем обусловлена реакция
Биуретовая	1	Раствор I—5 капель, 10% NaOH—5 капель, 1 % CuSO₄—1 капля
Биуретовая	2	Раствор II —5 капель, 10% NaOH—5 капель, 1 % CuSO₄—1 капля
Нингидри- новая	1	Раствор I—5 капель, 1% раствор нингидрина в ацетоне—2 капли, нагревают
Нингидри- новая	2	Раствор II —5 капель, 1% раствор нингидрина в ацетоне —2 капли, нагревают
Ксанто-протеиновая	1	Раствор I—5 капель, конц. HNO₃—3 капли, осторожно нагревают
Ксанто-протеиновая	2	Раствор II—5 капель, конц. HNO₃—3 капли, осторожно нагревают
Фоля	1	Раствор I—5 капель, 30 % NaOH—5 капель, 5 % (CH₃COO)₂Pb—1 капля, нагревают до кипения
Фоля	2	Раствор II—5 капель, 30 % NaOH—5 капель, 5 % (CH₃COO)₂Pb—1 капля, нагревают до кипения

Выводы

Заполнить таблицу, сравнить полученные окраски, определить, в каком растворе овальбумин, а в каком – желатина и обосновать этот выбор.

1 2 3 4 5 6 7 8 9 ... 22

Похожие:

	Руководств о к практическим занятиям по биохимии Н. Н. Чернов, Т. Т. Березов, С. С. Буробина, Е. В. Лукашева, И. П. Смирнова, С. П. Сяткин, В. А. Занин, О. М. Кузнецова, Н. П. Куркина,...		Руководство к практическим занятиям учащихся химико-биологических... Белоусов Д. Л. Руководство к практическим занятиям учащихся химико-биологических классов по разделу «Общая генетика». Троицк, 2009....
	Руководство к лабораторным и практическим занятиям по заводской технологии лекарств		Методические указания к практическим занятиям по дисциплине «Экономика организации» Экономика организации [Текст]: методические указания к практическим занятиям для студентов очной формы обучения по специальностям...
	Учебное пособие к практическим занятиям по курсу «Фармацевтическое товароведение» Учебное пособие предназначено для подготовки студентов к лабораторно-практическим занятиям и включает название темы, цель занятия,...		Руководство к практическим занятиям по психологии психических состояний... П 78 член-корр. Рао, д псх н., проф. В. И. Панов, д псх н., проф. А. Б. Леонова
	Руководство к практическим занятиям по фармакологии «фармакология... Руководство предназначено для студентов II-III курсов, обучающихся по специальности 060105(65) стоматология		Литература для студентов медицинских вузов (авторы) сборник тестов по биохимии В сборнике представлены тесты по биохимии, составленные в полном соответствии с теоретическим материалом по курсу «Биохимии», рекомендованному...
	Методические указания к практическим занятиям по общей, неорганической... Методические указания к практическим занятиям по общей, неорганической химии и органической предназначены для студентов специальности...		Методические рекомендации по практическим занятиям для студентов... Направляющие системы электросвязи: методические рекомендации по практическим занятиям для студентов специальностей 210400. 62, 210406....
	Материалы для подготовки к практическим занятиям по дисциплине «медицина катастроф» Для подготовки к занятиям студентов необходимо рекомендовать учебник Сахно или его электронную версию		О. П. Островерхов, А. Р. Умерова Островерхов О. П., Умерова А. Р. Руководство к практическим занятиям по клинической фармакологии. / Астрахань фгбоу во астраханский...
	Книгообеспеченность для специальность 30. 05. 01 – «Медицинская биохимия» Фармацевтическая технология. Технология лекарственных форм. Руководство к практическим занятиям [Электронный ресурс] : учебное пособие...		Методические рекомендации к практическим занятиям по дисциплине «Программирование... Методические рекомендации к практическим занятиям по учебной дисциплине «Программирование для автоматизированного оборудования»
	Методические рекомендации к практическим занятиям по фармакологии для студентов		«судебная медицина и психиатрия» Рекомендации по подготовке к семинарским (практическим) занятиям

Руководство, инструкция по применению