Практикум по ветеринарной микробиологии
|
Скачать 3.35 Mb.
|
Тема 6. МЕТОДЫ ВЫДЕЛЕНИЯ ЧИСТОЙ КУЛЬТУРЫ. ОПРЕДЕЛЕНИЕ БИОХИМИЧЕСКИХ СВОЙСТВ МИКРОБОВЧистой культурой называют микроорганизмы одного вида, выросшие на питательной среде отдельно от других видов. Часто употребляемый термин разновидность применим к микроорганизмам определенного вида, но отличающегося от последнего каким-либо одним признаком. Штаммом называют культуру одного вида микробов, выделенную из конкретного источника (из органов животного, из корма, пробы почвы, воды и других объектов). Клон — культуры микробов, происходящие из одной клетки. Выделение чистой культуры. Метод Дригальского. Берут несколько чашек Петри со стерильным МПА, в одну из них на поверхность агара наносят каплю смеси бактерий. Специальным шпателем или пастеровской пипеткой, изогнутой на огне горелки в виде шпателя, растирают каплю по поверхности агара, закрывают крышкой чашку. Этим же шпателем растирают поверхность другой чашки, затем третьей, четвертой и т.д. Чашки помещают в термостат, перевернув вверх дном, чтобы образующийся конденсат не смывал культуру. Самый густой рост будет в первой чашке, в последней чашке обычно получают изолированные друг от друга колонии. Колонии изучают по их внешнему виду, из них готовят бактериологический препарат, окрашивают и микроско-пируют. Отобрав колонию с характерными признаками и соответствующими морфологическими, тинкториальными свойствами для искомого вида возбудителя, из нее бактериологической петлей производят посев в пробирки с МПБ и МПА (отвивка, пересев колонии) для получения чистой культуры одного вида микробов. Для выделения чистой культуры бактерий часто используют метод, основанный на неодинаковом воздействии химических веществ, антибиотиков, добавленных к питательным средам, на развитие разных видов микробов. Эти вещества, угнетая рост одних видов, не влияют на рост других. На этом принципе основано применение многих элективных сред с красками: яично-крах-мальные среды для выделения микобактерий туберкулеза, глюко-зо-печеночная среда с генцианвиолетом (или кристаллвиолетом) для получения роста бруцелл и подавления роста других видов микроорганизмов. Метод Пастера. Основан на последовательном разведе: нии в 10 пробирках с жидкой средой капли смеси бактерий с расчетом получить в последней пробирке чистую культуру. Кох, введя в лабораторную практику использование плотных сред, применил принцип Пастера, но разведения производил в плотной расплавленной среде и содержимое каждой пробирки с разным количеством исследуемого материала выливал в отдельную чашку Петри. После выдерживания в термостате в последних чашках с наибольшим разведением обнаруживают изолированные колонии. Пересеяв отдельную колонию в среды в пробирках, культивируя в термостате, получают чистую культуру. При исследовании воды, молока, фекалий и других материалов используют методы, предложенные Пастером и Кохом. При выделении спорообразующих микроорганизмов, учитывая стойкость спор при нагревании, исследуемый материал (или смесь выросших разных культур) прогревают в водяной бане при 80 °С в течение 30 мин, при этом все вегетативные формы погибают, а споры сохраняются. После прогревания производят пластинчатый посев по Дригальскому с последующей отвивкой колонии. Помимо этого метода при выделении культуры спорообразующего патогенного вида микроба прибегают к биопробе: после прогревания смесь микробов вводят подкожно лабораторному животному (белая мышь, морская свинка); через 1...3сут животное гибнет. Труп вскрывают и из разных внутренних органов пастеровской пипеткой производят посев на питательные среды для получения чистой культуры возбудителя. Нередко для выделения чистой культуры подвижных видов бактерий используют метод Мечникова и Шукеви-ч а. Каплю исследуемого материала помещают на дно пробирки со скошенным агаром (обязательно в конденсационную воду). Если в смеси с разными бактериями будет находиться подвижный вид микроба (протей, столбнячная палочка и др.), то через 12... 18 ч на поверхности агара появляется рост бактерий искомого вида, пересевом которого с самой верхней части агара достигается получение чистой культуры. Для выделения анаэробов посевы на средах в пробирках, чашках Петри помещают в эксикатор или анаэростат. Биохимические свойства микробов. Для описания и идентификации микроорганизмов широко используют некоторые особенности их обмена веществ, выявляемые по способности расти на диагностических средах и вызывать те или иные превращения веществ, входящих в состав этих сред. К биохимическим признакам, которые, как правило, необходимы при определении систематического положения различных представителей бактерий, относят способность использовать углеводы, сахара и спирты. Микроорганизмы характеризуются неодинаковой способностью использовать различные углеводы и спирты в качестве единственных источников углерода и энергии. Для идентификации большинства гетеротоофных микроорганизмов необходимо определить, какие углеводы и спирты обеспечивают рост изучаемого организма и какими изменениями среды он сопровождается. Как правило, для этих целей используют следующие углеводы — арабинозу, ксилозу, глюкозу, фруктозу, галактозу, сахарозу, мальтозу, лактозу, а также спирты— глицерин и маннит. Рост на средах с этими соединениями может приводить к накоплению органических кислот, нейтральных продуктов, газов. Образование кислот регистрируют по изменению активной кислотности (рН) среды, газа —по появлению на поверхности среды пены и вытеснению среды из поплавка. Углеводы или спирты составляют 1 % основного состава среды. Основой (фоном) среды является водопроводная вода; в нее входят 0,5 % пептона и 0,1 % КНРО4. Чтобы обнаружить изменение рН, к среде добавляют индикатор бромкрезолпурпур из расчета 2 мл 1,6%-го спиртового раствора на 1 л среды: при рН 6,8 индикатор имеет пурпурный, а при рН 5,2 —желтый цвет. Вместо бромкрезолпурпура можно использовать в такой же концентрации бромтимолблау, который при рН 6,0 дает желтый цвет, а при рН 7,6 — синий. Чтобы обнаружить образование газа, в среду опускают поплавки (трубочки диаметром 5...7 мм и длиной 35...45 мм, запаянные с одного конца) запаянным концом вверх. Как правило, готовят основной фон среды, добавляют к нему индикатор; при необходимости доводят рН среды до 6,8 и разливают в пробирки с поплавками (по 9 мл в каждую); стерилизуют при 98,06 кПа. Углеводы и спирты следует стерилизовать отдельно в виде 10%-х водных растворов и Добавлять после стерилизации к стерильному фону среды. Растворы дисахаридов лучше стерилизовать фильтрованием, чтобы избежать их гидролиза при высокой температуре. Во все среды с углеводами и спиртами одновременно вносят по 0,1...02 мл суспензии клеток изучаемого микроорганизма и ставят в термостат. Если изучаемый организм развивается быстро, то результаты можно учитывать через 48...96 ч, а если медленно — через 7...10сут. Визуально по помутнению среды, образованию пленки, осадка отмечают рост или его отсутствие во всех использованных средах. По изменению цвета индикатора делают заключение о том, чем сопровождается использование субстратов — подкисле-нием или подщелачиванием среды, или рН среды не изменяется (цв. рис. IV). О газообразовании свидетельствует накопление газа в поплавке. Результаты сравнивают с контрольной средой, т. е. с фоном, не содержащим ни углеводов, ни спиртов. Все данные наблюдения вносят в таблицу. На основании полученных результатов делают заключение о том, какие углеводы и спирты использует изучаемый микроорганизм и сопровождается ли этот процесс накоплением кислоты или образованием газа. Аэробное окисление или сбраживание-углеводов. Это различие в метаболизме углеводов используют при характеристике многих представителей гетеротрофных микроорганизмов. Среду (состав: пептон — 0,2 г, NaCl — 0,5 г, КНРО4 — 0,03 г, вода дистиллированная — 100 мл, агар-агар — О,3г, бромтимолблау — 0,3мл 1%-го водного раствора; рН 7,1) разливают в пробирки. Углеводы готовят в виде 10%-х растворов, стерилизуют отдельно и вносят в среду после стерилизации так, чтобы их конечная концентрация соответствовала 1 %. Для каждого углевода используют две пробирки. После посева поверхность среды в одной пробирке заливают стерильным парафином или смесью вазелинового масла и парафина (1 : 1). Продолжительность культивирования составляет 8...10сут. Образование кислоты регистрируют по изменению цвета индикатора. Организмы, осуществляющие брожение, развиваются и подкисляют среду в двух пробирках, тогда как организмы, осуществляющие аэробное окисление, — только в одной. Гидролиз крахмала. Микроорганизмы, образующие амилазу, используют продукты гидролиза крахмала как источник углерода и энергии. Для выявления этой способности используют среду следующего состава (%): пептон—1,0, КНРО4 —0,5, растворимый крахмал —0,2, агар-агар—1,5; рН среды —6,8...7,0. Готовят 40 мл указанной среды, стерилизуют и разливают в две стерильные чашки Петри. Когда среда застынет, клетки изучаемого организма высевают штрихом по диаметру чашки. Продолжительность культивирования 7...10 сут. Гидролиз крахмала обнаруживают по зоне просветления среды вдоль штриха. Особенно четко она видна после обработки агаровой пластинки раствором Люголя. Так как йод — индикатор крахмала, то вся среда окрашивается в синий цвет, за исключением зоны гидролиза крахмала, которая остается бесцветной или может приобрести красно-бурую окраску, если крахмал гидролизуется в основном до декстрина. Разжижение желатины. Разжижать желатину способны микроорганизмы, выделяющие в среду протеолитические ферменты (коллагеназы). Для выявления этой способности исследуемый микроорганизм высевают на мясопептонную желатину (МПЖ), приготовленную следующим образом: к МПБ добавляют 10...15 % желатины и оставляют на 20...30 мин, чтобы желатина набухла, затем смесь нагревают на водяной бане до полного растворения желатины и разливают в пробирки по 8...10 мл. Стерилизуют при 4,8 Па 15 мин. Посев осуществляют уколом. Продолжительность культивирования 7... 10 сут при комнатной температуре. ■ Разжижение желатины или его отсутствие отмечают визуально. Если желатина разжижается, указывают интенсивность и форму разжижения. Разжижение бывает послойным, воронкообразным, мешковидным, пузырчатым {рис. 37). Образование аммиака. Свойственно микроорганизмам, дезаминирующим аминокислоты. Эту способность микроорганизмов выявляют при их росте в -  Рис. 37. Типы разжнження желатины МПБ. Для этого МПБ разливают в пробирки по 8...10мл в каждую, стерилизуют при 9,8 Па и засевают клетками изучаемого микроорганизма. Образование аммиака обнаруживают по изменению окраски лакмусовой бумаги. Для этого после посева помещают в пробирку над средой стерильную полоску красного лакмуса, зажимая ее между пробкой и горлышком пробирки. Чтобы затруднить улетучивание аммиака, пробку пробирки заворачивают в целлофан. При образовании аммиака полоска красного лакмуса синеет. Лакмусовые бумажки стерилизуют в чашке Петри автоклавирова-нием при 4,9 Па. Образование индола. Многие микроорганизмы в процессе развития образуют из триптофана индол, что обусловлено их триптофаназной активностью и служит важным диагностическим признаком. Индол обнаруживают по качественной реакции с реактивом Эрлиха. МПБ с 0,01 % триптофана разливают в пробирки по 8...10 мл, стерилизуют при 4,9 Па и засевают клетками изучаемого организма. Через 5...7 сут после посева проводят качественную реакцию на присутствие индола в культуре. Для этого на поверхность среды, не перемешивая, вносят 1 ...2 мл реактива Эрлиха: появление красной окраски свидетельствует о наличии индола. Параллельно проводят качественную реакцию на индол в стерильной среде. Образование сероводорода (H2S). Свойственно микроорганизмам, использующим в процессах метаболизма серосодержащие аминокислоты, например цистеин, цистин, метио-нин. Эту способность выявляют при выращивании микроорганизмов в МПБ, который разливают в пробирки по 8...10 мл в каждую, стерилизуют при 4,9 Па и засевают клетками изучаемого организма. После посева над средой помещают полоску бумаги, пропитанную раствором ацетата (уксуснокислого) свинца, зажав ее между пробкой и горлышком пробирки. Пробку пробирки заворачивают в целлофан, чтобы затруднить улетучивание сероводорода. Продолжительность культивирования 7...10 сут. Выделение H2S. При развитии микроорганизмов H2S в МПБ обнаруживают по почернению бумаги вследствие образования сульфида свинца. При развитии микроорганизмов на среде с железоаммонийным цитратом о выделении сероводорода судят по почернению среды из-за образования сульфида железа (FeS). Образование сероводорода характерно и для микроорганизмов, осуществляющих процесс сульфатредукции. Воздействие на молоко. Молоко содержит углеводы (лактозу), белки (казеин), витамины, минеральные соли, поэтому многие микроорганизмы хорошо в нем растут. Рост микроорганизмов в молоке может быть связан со сбраживанием лактозы, протеолизом казеина или с двумя этими процессами одновременно. Для определения воздействия микроорганизмов на молоко поступают следующим образом. Молоко обезжиривают сепарированием или центрифугированием в течение 15 мин при 2...3тыс. мин"'. При центрифугировании жиры образуют на поверхности молока достаточно плотную пленку. Обезжиренное молоко разводят водой (4 части молока на I часть воды), добавляют индикатор бромкрезолпурпур (2 мл 1,6%-го спиртового раствора на 1 л молока) или лакмус (10 мл 4%-го раствора на I л молока), разливают в пробирки по 8...10мл в каждую и стерилизуют при 4,9 Па. Результаты учитывают спустя 6... 14 сут после посева. Использование лактозы с образованием кислот отмечают по изменению цвета индикатора. Если степень подкисления достаточно велика, наблюдается коагуляция казеина (образование сгустка, часто сопровождаемое отделением сыворотки). Образование диоксида углерода (углекислоты) микроорганизмами в процессе использования лактозы хорошо видно по сгустку, который пронизан пузырьками. Воздействие микроорганизмов на казеин молока тоже вызывает коагуляцию, но она имеет место при нейтральной или слабощелочной реакции среды и является результатом образования микроорганизмами казеинолитических ферментов. При высокой активности этих ферментов отмечается «просветление» молока, называемое пептонизацией, что связано с протеолизом казеина. Отношение к кислороду. По отношению к кислороду различают четыре большие группы микроорганизмов: обли-гатные аэробы, микроаэрофилы, факультативные анаэробы (аэробы) и облигатные анаэробы. Для описания микроорганизмов и дальнейшей идентификации ограничиваются наблюдением роста изучаемого организма после посева уколом в агаризованную среду или после посева в расплавленную агаризованную среду. Строгие аэробы растут на поверхности среды и в самом верхнем ее слое, микроаэрофилы — на некотором расстоянии от поверхности среды, факультативные анаэробы развиваются по всей толще среды, облигатные анаэробы — только в глубине среды. Чтобы определить принадлежность изучаемого микроорганизма к одной из вышеуказанных групп, поступают следующим образом. МПА (или другую, благоприятную для микроорганизма среду) разливают в четыре пробирки на 1/2 ее высоты и стерилизуют при 30 Па. В две пробирки с МПА посев проводят уколом. В двух других пробирках МПА расплавляют в кипящей водяной бане и дают остыть до 48...50 X, а затем в среду вносят петлей исследуемый материал, тщательно перемешивают и дают агару застыть. Отмечают рост и его интенсивность по уколу и в толще среды. В соответствии с этим характеризуют отношение исследуемого микроорганизма к кислороду. Оксидазная активность. Этот тест используют обычно для дифференциации представителей семейства Pseudomonadaceae от других палочковидных бактерий, не окрашивающихся по Граму. Для определения оксидазной активности наносят несколько капель 1%-го водного раствора тетраметилфени-лендиамина на колонию в чашке Петри. Колонии организмов, обладающих оксидазной активностью, приобретают красную окраску, которая через 10...30 мин переходит в черную. Каталазная активность. Свойственна большинству аэробных микроорганизмов. Облигатные анаэробы и многие микроаэрофилы каталазу не образуют. Каталазную активность выявляют следующим образом. Исследуемый микроорганизм выращивают на поверхности плотной питательной среды. Наносят каплю 10%-го раствора Н2О3 на колонию или суспендируют клетки исследуемого микроорганизма в небольшом объеме этого раствора. Выделение О2, хорошо заметное по образованию пузырьков, свидетельствует о наличии в клетках каталазы. Можно выращивать бактерии и в жидкой среде. В этом случае к 1 мл жидкой культуры добавляют I мл раствора НгО^: значение рН должно быть около 7. Отношение к температуре. Подавляющее большинство микроорганизмов, с которыми имеют дело в лабораторных условиях, принадлежат к мезофилам. Однако оптимальная температура для роста микроорганизмов этой группы имеет достаточно широкий диапазон— от 20 до 45 °С. Поэтому необходимо определить температуру, обеспечивающую оптимальный рост изучаемого организма. Для этого штрихом засевают скощенные плотные питательные среды в 10 пробирках. Пробирки затем по две помещают в термостаты с температурой 20, 30, 37, 42 и 48 °С. Через 2...3 сут отмечают интенсивность роста исследуемого макроорганизма визуально по 4-балльной шкале: 0 —отсутствие роста, «+» —слабый рост, «++» —хороший рост; «+++» — очень хороший рост. После первого пассажа проводят второй пассаж с той лишь разницей, что для каждой температуры посевным материалом служат клетки соответствующего первого пассажа. Пробирки вновь помещают в термостаты с различной температурой; через 2...3 сут отмечают рост и его интенсивность. Чаще используют следующие методы регистрации ферментативной активности микроорганизмов. Выявление сахаролитической активности микроорганизмов. В состав дифференциально-диагностических углеводных сред (среды Гисса) входят различные соединения, которые можно условно назвать сахарами: моносахариды, полисахариды, многоатомные спирты. При утилизации углеводов в качестве конечных продуктов образуются кислоты и газообразные продукты. Соответственно расщепление углевода регистрируют по изменению рН среды и выделению газообразных продуктов. Закисление питательной среды улавливают при помощи различных индикаторов. Индикатор ВР, входящий в состав сухих сред Гисса, меняет цвет от розового в щелочной среде через серый при нейтральном рН до голубого или ярко-синего в кислой среде. Индикатор Андрэдэ (кислый фуксин— 0,5 г, 1%-й раствор гид-роксида натрия — 16 мл, дистиллированная вода — 84 мл) при за-кислении дает покраснение среды. В жидких средах Гисса образование газов при утилизации субстрата улавливают при помощи поплавков («газовок») — стеклянных трубочек, запаянных в верхнем конце и помещенных в пробирки. В «газовках» скапливаются газы, вытесняющие жидкую питательную среду; в полужидких средах Гисса газообразные продукты остаются в толше среды в виде пузырьков. Ферментация углеводов иногда происходит медленно, поэтому предварительный учет результатов проводят через 24...48 ч, а окончательный — через 1О...14сут инкубирования посевов. Тест с метиловым красным показывает степень закисления среды при расщеплении глюкозы. Метилрот как индикатор срабатывает в диапазоне рН 4,4...6,0. Исследуемую культуру выращивают 2...5сут в жидкой среде Кларка с глюкозой. Затем на 5 мл среды добавляют 5...6 капель раствора метилрота. Положительный результат — покраснение среды после внесения индикатора (рН 4,0...5,0). Среда Кларка: пептон —5 г, гидрофосфат калия —5 г, глюкоза — 5 г, вода дистиллированная — 1000 мл. Ингредиенты растворяют в воде, кипятят 2...3 мин, фильтруют через бумажный фильтр, доводят рН до 6,9...7,0, разливают по пробиркам и стерилизуют при 112 °С 20 мин. Тест Фогеса — Проскауера выявляет промежуточный продукт расщепления глюкозы — ацетоин (ацетилметилкарбинол, диметил-кетон). Исследуемую культуру выращивают на среде Кларка. К 1 мл культуры добавляют 0,6 мл 5%-го раствора анафтола, перемешивают, вносят 0,2 мл 40%-го раствора гидроксида калия и инкубируют 1 ч. Положительная реакция — красное окрашивание среды. Выявление протеолитических и других ферментов микроорганизмов. Протеолитические ферменты расщепляют белки питательной среды до промежуточных (пептоны, полипептиды, аминокислоты) или конечных (сероводород, индол, аммиак) продуктов. Характер роста микроорганизма на молоке. При посеве исследуемой культуры бактерий на стерильное обезжиренное молоко можно выявить фермент, расщепляющий молочный сахар (лактозу), и протеолитические ферменты, действующие на молочный белок (казеин). Расщепление лактозы приводит к закислению и свертыванию молока, при выделении протеолитических ферментов казеин постепенно растворяется — пептонизируется, в результате чего молоко просветляется, приобретает легкий кремовый оттенок, а на дне пробирки формируется осадок. Свертывание молока может также происходить под влиянием выделяемого некоторыми бактериями «сычужного» фермента, в этом случае реакция молока бывает щелочной. Иногда возможна пептонизация казеина без свертывания молока. Тест на гидролиз казеина в плотных питательных средах. Обезжиренное молоко диализуют для удаления лактозы, которая инги-бирует гидролиз казеина. В расплавленный питательный агар с двойной концентрацией агар-агара добавляют равный объем стерилизованного автоклавированием диал изо ванного молока. Исследуемую культуру бактерий засевают «штрихом» на поверхность питательной среды, разлитой в чашки Петри. Посевы инкубируют до 14сут. Перед учетом результатов поверхность среды заливают 10%-м раствором соляной кислоты. Положительный результат — просветление среды вокруг колоний. Тест на уреазу. Исследуемую культуру микроорганизма засевают на среду Кристенсена (пептон — 1 г, хлорид натрия — 5 г, ди-гидрофосфат калия —2 г, агар —20г, глюкоза— 1 г, 0,2%-й раствор фенолрота —6мл, 20%-й раствор мочевины— 100мл, вода дистиллированная —1000 мл) и выращивают 1...4сут. Положительный результат — покраснение среды в результате ее защелачи-вания. Тест на редукцию нитратов. Выявляет восстановление нитратов до нитритов. Культуру микроорганизма засевают в МПБ, содержащий 0,2% нитрата калия, инкубируют 48...12 ч. Затем в опытную и контрольную пробирки добавляют по 1 мл реактива с крахмалом (растворимый крахмал — I г, вода дистиллированная— 100 мл, йодид калия — 0,5 г). К этому раствору перед постановкой реакции добавляют несколько капель 10%-го раствора соляной кислоты. Положительный результат-—темно-синее окрашивание. Тест на общую фосфатазу. Исследуемую культуру микроорганизма засевают «штрихом» на поверхность питательного агара с натриевой солью дифосфата фенолфталеина, инкубируют 4...5 сут. Чашки переворачивают вниз крышкой, на внутреннюю поверхность которой наносят каплю 28...30%-го раствора нашатырного спирта. При наличии фосфатазы колонии приобретают красный цвет. Тест на оксидазу. Фильтровальную бумагу пропитывают 1%-м раствором тетраметилпарафенилендиамина дигидрохлорида. Бактериальную массу петлей наносят на поверхность бумажной полоски. Положительный результат — фиолетовое или пурпурное окрашивание через 10...60 с. Определение гемолитических свойств. Некоторые виды бактерий в процессе своей жизнедеятельности вырабатывают особые вещества белковой природы —гемотоксины, обладающие лизирую-щим действием на эритроциты. Для определения гемолитической способности производят посевы на питательные среды, содержащие 5 % дефибринированной крови. Чаще используют кровяной МГЛА. При росте на кровяной среде микроорганизмов, обладающих гемолитическими свойствами, вокруг колонии в результате лизиса эритроцитов образуется прозрачная зона (бесцветная или окрашенная). В жидких питательных средах при гемолизе среда делается прозрачной (красная лаковая кровь). Тест на редуцирующую способность бактерий (в метиленовом молоке) основан на следующей особенности: при окислительно-восстановительных реакциях у бактерий акцептором водорода может быть кроме молекулярного кислорода ряд органических красителей, которые, присоединяя водород, восстанавливаются и обесцвечиваются. Такие свойства отмечены у лакмусовой настойки, метиленовой сини, малахитового зеленого и др. Например, молоко с метиленовой синью готовят так: молоко подщелачивают 10%-м раствором карбоната натрия до рН 7,2 и добавляют 20 мл 1%-го водного раствора метиленовой сини на 1000 мл. Готовая среда голубого цвета. Результат учитывают через сутки инкубирования посевов. В случае редукции красителя среда окрашена в кремовый цвет. Тест-системы для быстрой идентификации бактерий по группе специально отобранных биохимических признаков обычно представляют собой пластмассовые пластины с лунками (микропробирками), заполненными различными сухими средами (субстратами). В эти среды вносят суспензию исследуемой культуры и после инкубирования учитывают результат. К тест-системам прилагают таблицы для учета результатов и идентификации микроорганизмов в зависимости от спектра выявленных ферментов. Разработаны тест-системы для идентификации энтеробакте-рий, анаэробов, несбраживающих бактерий и т. д. Нижегородский институт микробиологии и эпидемиологии выпускает тест-систему подобного типа — биохимические пластины для идентификации энтеробактерий (ПБДЭ), кроме того, разработаны тест-системы для санитарно-микробиологических целей. Принципы идентификации микроорганизмов. Основная задача бактериологического диагностического исследования — это определение таксономического положения выделенного микроорганизма путем сравнения его свойств со свойствами известных видов. В рутинной бактериологической практике микроорганизм идентифицируют, изучая его фенотипические признаки (морфологические, тинкториальные, культуральные, биохимические, патогенные). Стали получать распространение некоторые методы идентификации по генотипическим признакам, которые ранее в основном применяли в научной работе для классификации микроорганизмов с неясным таксономическим положением. В бактериологии для идентификации используют определители микроорганизмов. Наиболее популярный — определитель бактерий Берджи — включает в себя описание свойств известных видов микроорганизмов. Бактерии в этом руководстве по ограниченному числу морфологических и физиологических признаков объединены в большие группы. В пределах этих групп при помощи нескольких дифференцирующих признаков бактерии подразделены на семейства, роды и виды. Распределение микроорганизмов в этом определителе не отражает иерархической классификации, а преследует сугубо практическую цель — как можно быстрее и экономичнее установить таксономическое положение изучаемого микроорганизма. Идентификация неизвестного микроорганизма представляет собой процесс последовательного его отождествления с той или иной большой группой микробов, характеризующихся общими свойствами, затем с семейством в пределах группы, далее с тем нечном этапе исследуемый микроорганизм отождествляют (идентифицируют) по совокупности морфологических, тинкториаль-ных, культуральных, биохимических, патогенных свойств с каким-либо видом в пределах рода. В случае необходимости внутри вида устанавливают принадлежность культуры к био-, серо-, фа-говару. Работа с определителем Берджи предполагает использование достаточно большого количества тестов, характеризующих различные свойства микроорганизма. В практических диагностических лабораториях, исходя из эпизоотологических, клинических и патологоанатомических данных, обычно проводят бактериологические исследования, заранее ориентированные на обнаружение возбудителя определенной инфекционной болезни, по схеме, предусмотренной официальной инструкцией. |
Похожие:
 |
Плюс Утверждены Министерством сельского хозяйства Российской Федерации... Казань, Всероссийского научно-исследовательского института ветеринарной вирусологии и микробиологии, Дагестанского научно-исследовательского... |
|
Правила проведения дезинфекции и дезинвазии объектов государственного ветеринарного надзора Казань, Всероссийского научно-исследовательского института ветеринарной вирусологии и микробиологии, Дагестанского научно-исследовательского... |
 |
Правила проведения дезинфекции и дезинвазии объектов государственного ветеринарного надзора Казань, Всероссийского научно-исследовательского института ветеринарной вирусологии и микробиологии, Дагестанского научно-исследовательского... |
|
№4: «Детоксикационная терапия в ветеринарной медицине» Цель: Изучить отравления, наиболее часто встречающиеся в ветеринарной практике, и научится применять методы их детоксикации |
|
Бакалавра Работа выполнена на кафедре микробиологии спбгу научный... Выявление представителей рода Mycobacterium в аквариумной воде, находящейся в замкнутой системе очистки |
|
Отчёт по ветеринарно-санитарной экспертизе о прохождении производственной практики «Приложение». Глвсэ является подразделением Государственной ветеринарной службы и подчинена районной ветеринарной лаборатории, находящейся... |
|
Исследования в ветеринарной офтальмологии Шиотца и электронный аппланационный тонометр Tonopen; в российской ветеринарной практике наиболее часто применяют механический аппланационный... |
|
Инструкция №29/13-и по применению дезинфицирующего средства «хорт таблетки» «Республиканский центр гигиены, эпидемиологии и общественного здоровья» (гу «рцгэиОЗ» мз республики Беларусь); Государственное учреждение... |
|
Казанской государственной академии ветеринарной медицины имени Н. Э. Баумана часть 1 Казань 2015 Материалы международной научной конференции студентов, аспирантов и учащейся молодежи, посвященной 85-летию зоотехнического образования... |
|
Тезисы докладов 68 научно-практической конференции студентов, аспирантов... Печатается по решению Ученого совета факультета ветеринарной медицины и факультета биотехнологии и стандартизации фгбоу впо «Казанская... |
|
Практикум Федеральное агентство по образованию рв владивостокский государственный университет Практикум «Английский язык: Читаем и говорим по-английски. Часть 2» предназначен для студентов специальностей «Международные отношения»... |
|
Практикум Министерство образования и науки Российской Федерации Владивостокский... Практикум по дисциплине «Маркетинг» предназначен для проведения практических занятий и организации самостоятельной работы студенты... |
|
Практикум ю. А. Медведев Министерство образования и науки Российской... Информационные технологии в математике: Практикум / Владим гос пед ун-т. Владимир, 2005. 96 с |
|
Учебное пособие к лабораторным занятиям по фармацевтической химии... Методическое пособие «Анализ органических лекарственных веществ» предназначено для проведения лабораторно-практических занятий у... |
|
Римское право практикум Игнатенко А. В., Чорновол Е. П. Римское право: Учебное пособие. Практикум. Екатеринбург: Изд-во Уральской академии государственной... |
|
Е. В. Ежова практикум по уголовному праву Практикум по уголовному праву. Особенная часть: Учебное пособие для студентов заочного отделения. Уфа: риц башГУ, 2013. –81 с |