Руководство к лабораторным и практическим занятиям по заводской технологии лекарств
|
Скачать 1.16 Mb.
|
|
Тема :» Максимально очищенные препараты (новогаленовые) и препараты индивидуальных веществ. Особенности производства». Приготовление максимально очищенных препаратов Экстракция флавоноидов из цветки ромашки аптечной (Matricaria chamomilla). Целью данной работы является экстракция флавоноидов из растительного сырья: цветков ромашки аптечной (Matricaria chamomilla) и определение содержания флавоноидов в полученных составе. Задание. 1. Приготовить экстракт из цветков ромашки аптечной. 2. Провести стандартизацию на наличие флавоноидов в экстракте(хромотографический анализ на пластинки «Силуфол». 3.Вычертить в дневнике производственную схему получения экстракта флавоноидов из цветков ромашки аптечной. Флавоноиды – это обширная группа фенольных соединений (полифенолов) растительного происхождения, имеющих общую дифенилпропановую структуру . Флавоноиды и другие полифенолы содержатся практически во всех растениях, и более 4000 из этих веществ идентифицированы . Наиболее богаты этими веществами листья, цветки, а также стебли и кора растений (в них может содержаться до 3% флавоноидов). Некоторые из этих соединений являются более сильными антиоксидантами, чем β-каротин и витамины C и E. Флавоноиды и другие полифенолы широко используются для профилактики рака и болезней сердечно-сосудистой системы . Для извлечения флавоноидов из растительного сырья наиболее часто используют длительную мацерацию в растворе этанола с последующим выпариванием . Ромашка аптечная (Matricaria chamomilla) – однолетнее растение семейства сложноцветных, растет на лугах, в степях, на сорных местах. В ее цветочных корзинках содержатся эфирное масло, обладающее интенсивным синим цветом, обусловленным хамазуленом, флавоноиды (до 8% сухого веса, в том числе - производные апигенина, лютеолина и кверцетина), полисахариды, органические и жирные кислоты, никотиновая кислота, β-каротин, витамин С, кумарины, тритерпеновые спирты и другие компоненты . Средства из ромашки аптечной оказывают противовоспалительное, обезболивающее, спазмолитическое, противогипоксическое, противовирусное, противоаллергическое, желчегонное, кардиотоническое, успокоительное действие Необходимые материалы
4. Вода дистиллированная; 5. Склянки. Методика проведения. Экстракцию сырья проводили в 40 и 70%-ном этиловом спирте .Экстрагируют в циркуляционном аппарате Сокслета (согласно Государственной Фармакопее , сочетая при этом способ мацерации в течение 24 часов с нагреванием до температуры 85–90°С на водяной бане. 1.5.). Экстрагент частично отгоняют, добавляют 10 мл воды, после чего экстрагент отгоняют полностью. Раствор флавоноидов в воде подвергают фильтрованию на воронке Бюхнера через окись алюминия толщиной 1 —1,5 см. Готовый препарат анализируют по органолептическим признакам, подлинность, содержание спирта и количественное содержание действующих веществ. Продукцию и дневник предъявляют преподавателю. Проводят хромотографический анализ. Тонкослойная хроматография. Извлечение фильтруют через бумажный фильтр, смоченный тем же спиртом, отбрасывая первые 10 мл фильтрата (раствор А). На линию старта хроматографической пластинки «Sorbfil» (ПТСХ-АФ-А-УФ)размером 100×100 мм в виде полос длиной 1 см, шириной не более 3 мм наносят 40 мкл полученного извлечения из цветков ромашки (раствор А.), Пластинку с нанесенными пробами высушивают на воздухе в течение 5 мин и хроматографируют восходящим способом в системе растворителей: этилацетат-муравьиная кислота-вода (70:15:15) (смесь растворителей готовят и помещают в камеру непосредственно перед хроматографированием). Когда фронт растворителя пройдет 10 см, пластинку вынимают из камеры, высушивают в вытяжном шкафу до исчезновения запаха компонентов системы и просматривают в УФ-свете при длине волны 365 нм. На хроматограмме стандартного образца цинарозида должна обнаруживаться темная-коричневая зона адсорбции цинарозида, принятая за RS=1,0. На хроматограмме испытуемого раствора должна обнаруживаться темная-коричневая зона адсорбции с RS (по цинарозиду) около 1,0 и темно-коричневые зоны адсорбции с RS (по цинарозиду) около 0,2, около 0,5, около 0,7, около 0,9. Допускается наличие дополнительных зон (флавоноидовы)   Лабораторная работа № 5.(8 ч). Тема»Препараты биогенных стимуляторов и препараты из свежего растительного сырья.Современные сведения о химической природе биогенных стимуляторов.Биогенные препараты растительного происхождения.» Биогенные препараты растительного происхождения. Приготовление экстракта алоэ жидкий. Целью данной работы : приготовление экстракта алоэ жидкий и подтверждение его доброкачественности и подлинности. Задание. 1. Приготовить экстракт алоэ жидкий.
Необходимые материалы 1. листьев алоэ древовидного (Aloe arborescens Mill.) 2. вода дистиллированная; 3. 0,01 н раствором калия перманганата в присутствии кислоты серной 4. Склянки. Методика проведения. Экстракт алоэ жидкий (Extractum Aloes fluidum). Готовят из биостимулированных (по В. П. Филатову) листьев алоэ древовидного (Aloe arborescens Mill.).Исходное растение должно быть старше 2-летнего возраста. Срезают нижние листья, оставляя самые верхние — недоразвитые. Для биостимулирования листья помещают в темноте при температуре 4—8 °С на 10—12 сут. Затем их моют, обсушивают, удаляют зубчики и пожелтевшие концы и измельчают на вальцах. Полученную массу заливают троекратным количеством очищенной воды, настаивают 2 ч при комнатной температуре. Затем содержимое настойника кипятят 2 мин, фильтруют, охлаждают, измеряют количество (объем) и определяют его окисляемость (пробу фильтрата титруют 0,01 н раствором калия перманганата в присутствии кислоты серной). В соответствии с данными анализа фильтрат разбавляют водой так, чтобы его окисляемость равнялась 1500 мг кислорода на 1 л фильтрата. Затем добавляют натрия хлорид (7 ч на 1 л фильтрата), снова кипятят 2 мин и фильтруют. Водный экстракт алоэ жидкий — прозрачная жидкость от светло-желтого до красновато-желтого цвета. Применяется внутрь при язвенных болезнях желудка и двенадцатиперстной кишки, бронхитах и других заболеваниях по 1 чайной ложке 3 раза в день. Курс лечения 30—45 дней. В течение года его повторяют 3—4 раза. Выпускают во флаконах по 100 мл. Хранят в обычных условиях. Практическая работа № 3(4 ч). Тема «Основы биотехнологии лекарственных средств.» Ознакомьтесь с разделами программы «Введение», «Объекты биотехнологических производств», «Слагаемые биотехнологического производственного процесса». Изучите требования систем контроля качества производства лекарственных средств: GLP, GMP, GCP. Ответьте на поставленные вопросы. 1. Дайте определение понятию «ферментация». Используя материалы руководства по надлежащей производственной практике АФИ объясните значение терминов «биотехнологический процесс» и «классическая ферментация». Классификация и определение способов культивирования. 2. Аспекты контроля биотехнологических производств с их обоснованием. 3. Требования к составу питательных сред. Классификация питательных сред, способы стерилизации, режимы подачи в ферментер. 4. Определение биотехнологии по Овчинникову, обоснование современной формулироваки. Характеристика основных аспектов биотехнологии. История развития биотехнологии как науки. 5. Определение и характеристика объектов биотехнологических производств (с примерами использования). Определение гибридомы. Типы классификаций биотехнологических производств (с примерами). 6. Вам определена задача производства антибиотиков. Выберите оптимальный тип и метод культивирования, обоснуйте. Дайте характеристику выбранных процессов, отобразите графически. 7. Вам определена задача производства рекомбинантного интерферона. Выберите оптимальный тип и метод культивирования, обоснуйте. Дайте характеристику выбранных процессов, отобразите графически. 8. Охарактеризуйте основные этапы биотехнологического производства с использованием микроорганизмов в качестве биообъектов. 9. Охарактеризуйте основные этапы биотехнологического производства с использованием сырья животного происхождения. 10. Охарактеризуйте основные этапы биотехнологического производства с использованием растительного сырья. 11. Дайте определение понятию «ферментация». Используя материалы руководства по надлежащей производственной практике АФИ объясните значение терминов «биотехнологический процесс» и «классическая ферментация». Классификация и определение типов культивирования (с указанием графиков). 12. Вам определена задача производства колисодержащих прбиотиков. Выберите оптимальный тип и метод культивирования, обоснуйте. Дайте характеристику выбранных процессов, отобразите графически. 13. Вам определена задача производства инактивированных вакцин. Выберите оптимальный тип и метод культивирования, обоснуйте. Дайте характеристику выбранных процессов, отобразите графически. 14. Вам определена задача производства метионина. Выберите оптимальный тип и метод культивирования, обоснуйте. Дайте характеристику выбранных процессов, отобразите графически. 15. Вам определена задача производства кобаламина. Выберите оптимальный тип и метод культивирования, обоснуйте. Дайте характеристику выбранных процессов, отобразите графически. 16. Обозначьте схематически структуру биотехнологического производства. Опишите основные процессы в каждом из отделений. Дайте определение ферментации. Используя материалы руководства по надлежащей производственной практике АФИ объясните значение термина «классическая ферментация». 17. Вам определена задача производства глицина. Выберите оптимальный тип и метод культивирования, обоснуйте. Дайте характеристику выбранных процессов, отобразите графически. 18. Вам определена задача производства рекомбинантного инсулина. Выберите оптимальный тип и метод культивирования, обоснуйте. Дайте характеристику выбранных процессов, отобразите графически. 19. Классификация биообъектов по способам их создания. Виды изменчивости, классификация мутаций. Обоснуйте требования к штаммам продуцентам. Перечислите преимущества использования микроорганизмов в качестве объектов биотехнологических производств. 20. Изложите суть основных разделов GCP. Виды документации. 21. Изложите суть основных разделов GМP. Виды документации. 22. Изложите суть основных разделов GLP. Виды документации. 23. Критерии подбора ферментеров при реализации конкретных целей. Виды ферментеров. 24. Отрасли биотехнологической промышленности. Характеристика, продукция. Обоснуйте преимущества производства и применения биотехнологической продукции по сравнению с БАВ, полученных методами химического синтеза, из сырья животного происхождения, из растительного сырья. Задание №2. Ознакомьтесь с разделом программы «Методы создания и совершенствования биообъектов». Изучите материалы по теме «Клеточная инженерия». Ответьте на поставленные вопросы. 1. Дайте определения терминам «протопласт», «гибридома». Опишите стадии процесса протопластирования с применением характерной терминологии при создании гибридом. 2. Дайте определение термину «протопласт». Опишите стадии процесса получения сферопластов с применением характерной терминологии при введении плазмид в клетки Saccharomyces cerevisiae. 3. Дайте определение термину «протопласт», укажите особенности строения данной структуры. Значение процесса протопластирования. Перечислите методы выделения протопластов. Укажите функции фьюзогенов, стабилизаторов, Обоснуйте необходимость их применения. Укажите пути преодоления «-» заряда при слиянии протопластов. 4. Возможности и методы межвидового и межродового слияния клеток. 5.Методы культивирования растительных клеток и протопластов. Дайте определения термину «протопласт». 6. Биотехнологическое производство и ограниченность или малая доступность ряда видов растительного сырья как источника лекарственных веществ. 7. Понятие тотипотентности растительных клеток. Каллусные и суспензионные культуры. Особенности роста растительных клеток в культурах. 8. Понятие тотипотентности растительных клеток.. Опишите этапы, предшествующие процессу дедифференцировки растительных клеток и следующие за ним. Опишите суть процесса дедифференциоровки. Согласны ли Вы с утверждением, что дедифференцировка возможна только в лабораторных условиях? 9. Опишите процессы вторичной дифференцировки на примере получения корней женьшеня в лабораторных условиях. 10.Требования к составу питательных сред для культур растительных тканей. Классификация питательных сред. Понятие о цитокининах и ауксинах, их свойства. Соотношение ростовых факторов при органогенезе. 11. Определение и этапы соматической гибридизации. 12. Особенности синтеза вторичных метаболитов в процессе культивирования растительных клеток. 13. Типы культур клеток и тканей. Их значение для биотехнологических процессов. 14. Условия культивирования изолированных тканей и клеток растений. Физические факторы, требования асептики. 15. Группы веществ, получаемых при культивировании растительных тканей. К какой группе относятся препараты алоэ и очитка большого, перечислите их с указанием назначений. Опишите метод, применяемый для их получения. Заполните таблицу
16. Охарактеризуйте стадии промышленного производства БАВ из культур клеток растений. 17. Укажите требования к созданию питательных сред для культивирования растительных клеток. Условия и методы стерилизации питательных сред. 18. Опишите процессы обработки биомассы, выделения и очистки БАВ при промышленном культивировании растительных клеток 19. Опишите технологические условия получения берберина. 20. Дайте определение термину «протопласт». Опишите стадии процесса получения продуцента берберина для промышленного культивирования (с применением характерной терминологии). 21. Опишите стадии получения аймалина из каллусных тканей. Назовите продуцент. 22. Охарактеризуйте суть и способы клонального микроразмножения. Задание № 3. Ознакомьтесь с разделом программы «Генетическая инженерия». Ответьте на поставленные вопросы. 1. Опишите этапы создания рекомбинантных аллергенов 2. Опишите этапы создания антибиотиков генно-инженерными методами 3. Опишите этапы создания рекомбинантного инсулина 4. Опишите этапы создания рекомбинантного соматотропина 5. Опишите этапы создания рекомбинантного лейцин-энкефалина. 6. Опишите этапы создания рекомбинантных антител 7. Перечислите структуры, используемые в качестве векторов. Опишите свойства векторов, определяющие необходимость их применения при создании рекомбинантной ДНК 8. Опишите этапы создания рекомбинантного интерферона 9. Определите степень необходимости использования последовательности Шайн-Дальгарно при создании трансформантов 10 Опишите способы введения рекомбинантных ДНК в клетки животных 11. Для идентификации генетического материала было предложено использовать РНК-зонд: Ц-Ц-Ц-А-У-У-Г-Г-Г-Т-Т-А-А-Ц-Т-У-У-У. Определите искомую нуклеотидную последовательность ДНК, исключив все возможные ошибки. Объясните сделанное заключение. 12. На чем основан принцип ДНК-диагностики? Укажите пути создания основного компонента диагностических тестов для данного вида исследований. 13. В результате плавления и расщепления участка молекулы ДНК получили следующие фрагменты: А-Т-Г-Ц-А-А-Т-Т; А-Г-Г-Т-А-Т-Г-Ц; Т-А-Ц-Г; Ц-Т-Г-А-Г-А-Т-Ц-Ц-А; Т-А-Ц-Г; Ц-Т-Г-А-Г-А-Ц-Т-Ц-Т. Какие фрагменты образуются в результате «отжига». Перечислите синонимы указанных процессов. Опишите условия их проведения. 14. В результате плавления и расщепления участка молекулы ДНК получили следующие фрагменты: А-Т-Г-Ц-А-А-Т-Т; А-Г-Г-Т-А-Т-Г-Ц; Т-А-Ц-Г; Ц-Т-Г-А-Г-А-Т-Ц-Ц-А; Т-А-Ц-Г; Ц-Т-Г-А-Г-А-Ц-Т-Ц-Т. Составьте фрагменты, которые будут подвержены лигированию, и фрагмент, выступающий в качестве линкера. Опишите условия данного типа лигирования. Перечислите известные вам виды лигирования. 15. Охарактеризуйте два основных класса генетической рекомбинации, применяемой при создании штаммов методами генетической инженерии. 16. Дайте определение понятиям: рекомбинантный белок; рекомбинантная ДНК; вектор; лигирование; секвенирование; плавление; отжиг; трансформант; трансфекция; трансформация; рестриктазы; промотор; оперон. 17. Опишите методологию создания трансгенных животных. Приведите примеры их использования в медицинских целях. 18. Опишите методологию создания трансгенных растений. Приведите примеры их использования в медицинских целях. 19.Определение и направления генетической инженерии как науки. Перечислите задачи. Обозначьте основные этапы развития 20. Охарактеризуйте группы ферментов, применяемых на разных этапах создания рекомбинантной ДНК. 21. Основные направления генной терапии. Пути введения рекомбинантной ДНК в организм. 22. Определение, классификация и технологические стадии создания рекомбинантных зондов. Направления в применении. 23. Опишите методы секвенирования, используемые в биотехнологии рекомбинантных ДНК. 24. Укажите факторы, определяющие скорость ренатурации спирали ДНК. Опишите условия данного процесса и технологические стадии, ему предшествующие. |
Похожие:
 |
Руководство к практическим занятиям по биохимии Р 82 Руководство к практическим занятиям по биохимии: Учебное пособие/ Под ред. И. П. Смирновой. М.: Оргсервис-2000, 2008. 101 с |
|
Руководство к лабораторным занятиям по патологической анатомии по специальности стоматология Руководство к лабораторным занятиям по патологической анатомии по специальности – стоматология / Авт. И. И. Бабиченко, А. Л. Владимирцева,... |
|
Методические указания по дисциплине пд. 02 Химия для выполнения лабораторных... Методические указания и задания к лабораторно-практическим занятиям для студентов специальности 35. 02. 05 Агрономия по дисциплине... |
 |
Методические указания по дисциплине оп. 06 Основы аналитической химии... Методические указания и задания к лабораторно-практическим и самостоятельным занятиям по оп. 06 Основы аналитической химии для студентов... |
|
Руководство к практическим занятиям учащихся химико-биологических... Белоусов Д. Л. Руководство к практическим занятиям учащихся химико-биологических классов по разделу «Общая генетика». Троицк, 2009.... |
|
Методические материалы к лабораторным занятиям по фармацевтической технологии (9 семестр) Наименование темы: Приготовление растворов для инъекций в условиях рецептурного производства |
|
Методические указания к практическим занятиям по дисциплине «Экономика организации» Экономика организации [Текст]: методические указания к практическим занятиям для студентов очной формы обучения по специальностям... |
|
Учебное пособие к практическим занятиям по курсу «Фармацевтическое товароведение» Учебное пособие предназначено для подготовки студентов к лабораторно-практическим занятиям и включает название темы, цель занятия,... |
|
Курсовая работа с аптечной технологии лекарств на тему: «Совершенствование... На базе новейших научных открытий создаются принципиально новые, более совершенные и производительные технологические процессы,... |
|
Руководство к практическим занятиям по психологии психических состояний... П 78 член-корр. Рао, д псх н., проф. В. И. Панов, д псх н., проф. А. Б. Леонова |
|
А. И. Мансурова, Р. Р. Зиннатов методы кха в экологическом мониторинге учебное пособие Методы кха в экологическом мониторинге: Методическое пособие к лабораторным и практическим занятиям для студентов направления подготовки... |
|
Методические материалы к лабораторным занятиям по фармацевтической технологии тема №1 Наименование темы: Настои и отвары. Факторы, влияющие на качество водных извлечений из сырья, содержащего дубильные вещества, полисахариды,... |
|
Методические указания к практическим занятиям по общей, неорганической... Методические указания к практическим занятиям по общей, неорганической химии и органической предназначены для студентов специальности... |
|
Российской Федерации Федеральное государственное бюджетное образовательное... Руководство к лабораторным и практическим работам для студентов неинженерных сельскохозяйственных специальностей |
|
Учебно-методическое пособие к лабораторным работам по дисциплине... Математическое моделирование приборных системах: Учебно-метод пособие к практическим занятиям / Самар гос техн ун-т; Сост. А. О.... |
|
Методические указания к практическим занятиям пооп «Основы технологии... Составлены в соответствии с учебным планом и рабочей программой оп «Основы технологии отделочных строительных работ» для подготовки... |